醛糖还原酶对大鼠肾脏系膜细胞表达纤连蛋白和Ⅳ型胶原蛋白的影响

• 作者: 张农 张秀荣 蒋涛 赵仲华 车琪
• 来源期刊: 中华病理学杂志
• 关键词: 肾硬化症 转染 纤连蛋白类 胶原
• 年，卷（期）: 2005,（3）
• 所属期刊栏目: 实验病理学
• 页码范围: 171-174
• 页数: 4页
• 字数: 3889字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j.issn:0529-5807.2005.03.011

摘要

目的探讨醛糖还原酶(AR)对大鼠肾脏系膜细胞(MsC) 表达细胞外基质成分纤连蛋白(FN)和Ⅳ型胶原(Col Ⅳ)蛋白的影响,以及AR在肾小球硬化病变过程中的可能作用及其机制.方法采用酶切、连接方法构建真核表达质粒pCDNA3-AR,采用脂质体介导以及G418筛选的方法,将pCDNA3-AR稳定转染至MsC中,应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Western印迹法和免疫荧光检测转染MsC表达AR情况; 以Western 印迹法检测正常MsC、AR转基因MsC、应用AR抑制剂Sorbinil和Zopolrestat的正常MsC、转化生长因子-β1(TGF-β1)作用后的正常MsC的FN和Col Ⅳ蛋白表达情况. 结果与正常MsC相比,TGF-β1作用后的正常MsC FN和Col Ⅳ蛋白表达水平分别增高1.6和1.7倍(P<0.01);AR转基因MsC的FN、Col Ⅳ表达分别增加1.8倍和1.5倍;应用Sorbinil时,FN和ColⅣ分别降低1.8倍和1.4倍(P<0.05);应用Zopolrestat时,FN和Col Ⅳ分别降低1.7倍和1.4倍(P<0.05).结论 AR高表达或活性受抑制时可以明显影响MsC FN、ColⅣ的蛋白表达,提示AR可能与肾小球硬化的病理过程有关.