双重PCR-毛细管电泳法快速检测大豆中转基因成分

• 作者: 周颖 苏宁 裴晓芳 雍莉 黎源倩
• 来源期刊: 四川大学学报（医学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 双重PCR 激光诱导荧光-毛细管电泳 转基因大豆 PCR产物检测 羟丙基甲基纤维素
• 年，卷（期）: 2005,（1）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 119-123
• 页数: 5页
• 分类号: Q657.311
• 字数: 4151字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-173X.2005.01.034

摘要

目的建立抗草甘膦转基因大豆的快速检测方法.方法针对转基因大豆基因组中被导入的35S启动子、NOS终止子和CP4-EPSPS抗草甘膦基因等外源基因,自行设计了两对引物,采用双重PCR同时扩增上述基因,用8 g/L羟丙基甲基纤维素为筛分介质,在50 cm×100 μm i.d.涂壁毛细管中,于-10 kV电压下用激光诱导荧光-毛细管电泳检测转基因大豆的 PCR扩增产物.结果在优化的PCR反应和毛细管电泳条件下,本法可以同时检测出转基因大豆样品中三种外源基因,双重PCR扩增产物经测序证实与原基因序列完全一致,表明本研究设计的引物合理,扩增结果可靠.毛细管电泳进样量仅需5 nl,分析时间为24 min,迁移时间的相对标准偏差≤3.2%.结论本方法较常规琼脂糖凝胶电泳特异性高,分析时间短,重现性好,检测灵敏,适合于大豆中转基因成分的快速检测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黎源倩	四川大学华西公共卫生学院卫生检测学教研室	79	1286	21.0	30.0
2	周颖	四川大学华西公共卫生学院卫生检测学教研室	45	217	9.0	12.0
3	雍莉	四川大学华西公共卫生学院卫生检测学教研室	5	97	4.0	5.0
4	裴晓芳	四川大学华西公共卫生学院卫生检测学教研室	5	118	5.0	5.0
5	苏宁		1	13	1.0	1.0