反义c-myc基因转染抑制人晶状体上皮细胞增殖的研究

• 作者: 刘廷 孙洁 王瑶 谢立信
• 来源期刊: 中华眼科杂志
• 关键词: 晶体 上皮细胞 基因,myc RNA,反义 转染 细胞分裂
• 年，卷（期）: 2005,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 161-165
• 页数: 5页
• 字数: 5031字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:0412-4081.2005.02.015

摘要

目的探讨腺病毒介导的反义c-myc基因(Ad-AS-myc)转染对人晶状体上皮细胞(HLEC)系B3(HLE-B3)增殖、凋亡及细胞周期的影响. 方法将Ad-AS-myc转染HLE-B3,观察细胞形态变化;采用生长曲线法、噻唑蓝比色法分析细胞增殖改变;使用流式细胞仪测定细胞凋亡变化、分析细胞周期改变(DNA倍体法);采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法、Western免疫印迹法检测细胞c-myc mRNA及其蛋白产物表达的变化. 结果 Ad-AS-myc成功转染后,HLE-B3逐渐变圆、脱壁.转染后24～96 h细胞的增殖受到抑制,与相应对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.01);凋亡细胞比例(转染48 h为18.33%,转染96 h为26.93%)明显升高,与相应对照组(48 h为3.19%,96 h为1.75%)比较,差异均有统计学意义(P<0.01);细胞出现G1期阻滞现象,表现为G1期细胞比例[转染48 h为(60.50±7.59)%,转染96 h为(81.90±8.60)%]增加和S期细胞比例[转染48 h为(28.40±3.38)%,转染96 h为(16.75±8.97)%]下降,与相应对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.01);RT-PCR法和Western免疫印迹法检测发现c-myc mRNA及其蛋白产物水平特异性下调. 结论 Ad-AS-myc可成功转染HLE-B3,并特异性抑制c-myc基因的表达,诱发细胞G1期阻滞,有效抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡.(中华眼科杂志,2005,41:161-165)