转导hTERT基因致人骨髓基质细胞永生化及向神经元样细胞诱导分化的研究

• 作者: 何乐 张亚卓 朴明学 王忠诚 王申五 蒙和
• 来源期刊: 中国微侵袭神经外科杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 间质干细胞 转导,遗传 端粒,末端转移酶 细胞分化 无限增殖化
• 年，卷（期）: 2005,（7）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 313-316
• 页数: 4页
• 分类号: Q784|Q254
• 字数: 3092字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-122X.2005.07.011

摘要

目的建立永生化的人骨髓基质细胞(hMSC)系,以供神经外科临床和基础研究使用.方法原代培养人骨髓基质细胞,采用含有人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因的逆转录病毒载体上清感染hMSC,经筛选得到阳性克隆,在体外进行连续培养.应用PCR、逆转录PCR(RT-PCR)和免疫细胞化学方法检测hTERT基因的整合及表达情况,并用10%β-巯基乙醇(β-ME)、反式维甲酸(RA)、Forskolin和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对转化后的hMSC-hTERT细胞进行诱导,使其向神经元样细胞分化.结果外源性hTERT基因在DNA、RNA和蛋白质水平均有表达,诱导后的hMSC-hTERT细胞表达神经元特异性标志物神经核蛋白(NeuN)和βⅢ微管蛋白(Tubulin-βⅢ).hMSC-hTERT细胞至今已传至82代.结论外源hTERT基因在hMSC细胞中稳定整合并表达,永生化的hMSC细胞系成功建立:在一定诱导条件下,永生化的hMSC细胞能够在体外分化成神经元样细胞.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张亚卓		164	1644	21.0	33.0
2	王忠诚		151	2157	24.0	36.0
3	何乐		18	193	7.0	13.0
4	王申五	北京大学人民医院中心实验室	42	386	10.0	17.0
5	蒙和		5	24	2.0	4.0
6	朴明学		2	14	2.0	2.0