单管多重PCR快速检测中国人三种常见缺失型α-地中海贫血基因

• 作者: 周玉球 张永良 徐湘民 李文典 李莉艳 莫秋华 郑勤
• 来源期刊: 中华医学遗传学杂志
• 关键词: α-地中海贫血 多重聚合酶链反应 分子诊断 产前诊断
• 年，卷（期）: 2005,（2）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 180-184
• 页数: 5页
• 字数: 4229字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j.issn:1003-9406.2005.02.013

摘要

目的建立一种简单快速、准确可靠、经济实用的检测常见缺失型α-地中海贫血(α-地贫)突变(--SEA、-α3.7和-α4.2)的单管多重PCR技术以用于α-地贫的分子筛查和产前诊断.方法采用gap-PCR方案设计4组PCR引物并对PCR反应条件进行系统优化以扩增代表这3种地贫和α2基因存在的特异性DNA片段.此外,还设计1对引物扩增 LIS1基因3′-端非翻译区片段作为整个PCR体系扩增成功与否的内在对照.采用盲法分析对该技术的特异性、准确性和可靠性进行评价并应用于产前分子诊断中.结果所建的单管多重PCR技术成功地检出这3种常见缺失型α-地贫突变的纯合子、杂合子和双重杂合子.正常人出现 LIS1和α2基因特异扩增片段,而--SEA、-α3.7和-α4.2杂合子除了出现正常人的2条扩增带外,还分别出现1条指示这些突变存在的特异性扩增片段.盲法分析结果显示,该技术对α-珠蛋白基因型经过Southern印迹法或DNA直接测序确证的DNA标本的诊断准确性达到100%,并被成功地应用于9个重症α-地贫高风险家庭的产前诊断中.结论该技术可准确、快速地检测--SEA、-α3.7和-α4.2 3种常见缺失型α-地贫突变,且具有经济和实用的优点,非常适合于α-地贫的大人群分子筛查和临床样品的基因诊断.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐湘民	南方医科大学医学遗传学教研室	27	242	9.0	15.0
2	李莉艳	南方医科大学医学遗传学教研室	17	168	5.0	12.0
3	莫秋华	南方医科大学医学遗传学教研室	2	52	2.0	2.0