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摘要:
目的利用基因重组技术体外表达血小板糖蛋白Ⅵ(GPⅥ)胞外区片段.方法采用PCR方法扩增GPⅥ胞外区片段cDNA,构建表达载体pET-20b(+)-GPⅥ,转化大肠杆菌BL21(DE3)pLysS,经IPTG诱导表达.表达产物经Ni-NTA Resin纯化后复性;使用Western blot方法鉴定重组蛋白性质.结果PCR扩增产物经测序证明与GPVI胞外区cDNA序列完全一致;酶切分析证明成功构建了表达载体pET-20b(+)-GPⅥ;原核细胞经诱导表达后出现新的相对分子量为32 kd的蛋白条带,诱导产物以包涵体形式存在;Western印迹分析表明重组蛋白可与抗Penta-His抗体和抗GPⅥ多抗特异性结合.结论正确构建了GPⅥ表达载体并成功表达重组蛋白,纯化、复性后的重组蛋白具有良好的抗原性.
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内容分析
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文献信息
篇名 血小板胶原受体糖蛋白Ⅵ体外表达
来源期刊 苏州大学学报(医学版) 学科 医学
关键词 血小板 血小板糖蛋白Ⅵ 胶原
年,卷(期) 2005,(1) 所属期刊栏目 基础研究
研究方向 页码范围 19-22
页数 4页 分类号 R331.143
字数 3186字 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.1673-0399.2005.01.007
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 董宁征 苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所 42 164 7.0 11.0
2 白霞 苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所 58 167 6.0 8.0
3 季顺东 苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所 28 94 5.0 8.0
4 江淼 苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所 17 42 4.0 5.0
5 祝怀平 苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所 7 27 3.0 5.0
6 余自强 苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所 19 44 4.0 6.0
传播情况
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研究主题发展历程
节点文献
血小板
血小板糖蛋白Ⅵ
胶原
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
苏州大学学报(医学版)
双月刊
1673-0399
32-1674/R
大16开
苏州市十梓街1号
28-81
1960
eng
出版文献量(篇)
6185
总下载数(次)
2
总被引数(次)
22986
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