卡氏肺孢子虫特异性DNA探针的制备及其实验应用

• 作者: 张英杰 徐霞 陈锡慰
• 来源期刊: 中国人兽共患病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 卡氏肺孢子虫 卡氏肺孢子虫肺炎 DNA探针 斑点杂交
• 年，卷（期）: 2005,（6）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 498-500
• 页数: 3页
• 分类号: R382.3
• 字数: 2239字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2005.06.015

摘要

目的制备特异、敏感的卡氏肺孢子虫(Pc)DNA探针,用于检测卡氏肺孢子虫肺炎(PCP)患者临床标本中的Pc DNA.方法 PCR扩增获得Pc的线粒体核糖体RNA大亚基基因,以其为模板,采用随机引物法制备半抗原地高辛标记的探针.检测探针的敏感性和特异性后,用斑点杂交法检测实验大鼠肺组织和PCP患者临床标本中的Pc DNA.结果敏感性检测显示该探针可检出2pg水平的Pc DNA,特异性检测显示该探针仅与Pc DNA杂交,而不与伯氏疟原虫、恶性疟原虫、弓形虫、人白细胞及正常大鼠肺组织DNA反应.斑点杂交检测PCP大鼠肺组织中的Pc DNA,检出率为73.7%,低于PCR结合斑点杂交的检出率94.7%.用该探针从1例肾移植术并发PCP患者的支气管肺泡灌洗液中检测到Pc DNA.结论制备的Pc DNA探针具有敏感性高、特异性好、无放射性污染等优点,对Pc DNA有良好的检测效果.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈锡慰	南京医科大学病原生物学系	18	58	4.0	6.0
2	徐霞	山东大学医学院生物化学教研室	9	53	4.0	7.0
3	张英杰	山东省淄博市临淄区人民医院肿瘤内科	4	6	2.0	2.0