增殖细胞核抗原短发夹状RNA对人骨肉瘤细胞生长的影响

• 作者: 刘红云 吴翠环 张其亮 杨述华
• 来源期刊: 中华病理学杂志
• 关键词: 增殖细胞核抗原 RNA 免疫组织化学 骨肉瘤
• 年，卷（期）: 2005,（3）
• 所属期刊栏目: 实验病理学
• 页码范围: 167-170
• 页数: 4页
• 字数: 3304字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j.issn:0529-5807.2005.03.010

摘要

目的构建增殖细胞核抗原(PCNA)短发夹状RNA表达载体,检测其对人骨肉瘤细胞PCNA表达、细胞增殖及细胞凋亡的影响.方法体外构建PCNA shRNA 表达载体pSilence2.1-neo-PCNA,转染人骨肉瘤细胞系MG-63,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测转染前后PCNA mRNA表达,免疫组织化学(SP)法检测转染前后PCNA 蛋白的表达,四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法及克隆形成试验检测细胞增殖活性,3H-胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)细胞掺入试验检测细胞DNA合成,流式细胞仪检测细胞周期分布,吖啶橙染色法检测细胞凋亡情况.结果 pSilence2.1-neo -PCNA载体转染能显著抑制PCNA mRNA及蛋白的表达,转染后mRNA表达抑制率为80.51%﹑增殖指数值为空白组的25.68%.转染组48 h细胞增殖抑制率为61.78%,转染组3H-TdR掺入率明显低于空白组(P<0.01).细胞周期分析显示,siRNA转染组G0G1期细胞含量显著增加,而S期细胞含量显著减低.转染组凋亡率为16.54%. 结论 pSilence2.1-neo-PCNA可显著抑制MG-63细胞PCNA 的表达及细胞增殖活性,促进细胞凋亡.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘红云	烟台市烟台山医院病理科	3	7	1.0	2.0
2	吴翠环	华中科技大学同济医学院病理学系	46	462	10.0	19.0