RNA干扰在猪内皮细胞抵御补体介导的细胞毒中的作用

• 作者: 刘斌 夏振雄 张伟杰 曹荣华 朱珉 王树森 祁洪刚 陈实 陈栋
• 来源期刊: 中华医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 基因表达调控 内皮 细胞 补体 移植,异种
• 年，卷（期）: 2005,（16）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1133-1136
• 页数: 4页
• 分类号: R3
• 字数: 2871字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:0376-2491.2005.16.015

摘要

目的评价RNA干扰(RNAi)是否能有效抵御补体介导的对猪内皮细胞的细胞毒作用.方法将小分子干扰RNA (SiRNA)转染猪内皮细胞系PED,检测PED转染前后α1,3-半乳糖转移酶(α1,3-GT) Mrna及α-半乳糖糖链(αGal)抗原表位的表达,并评价RNAi对补体介导的细胞毒的影响.结果 SiRNA-1 /PED的α1,3-GT基因异构体(isoform)表达量与空转组(Mock)相比减少了70%(isoform1,69%;isoform2, 72%)(P<0.05),但SiRNA-2 /PED的α1,3-GT表达量与错配组及空转组相比差异无统计学意义(P>0.05),流式细胞学检查显示,SiRNA-1/ PED的αGal平均荧光强度(52.9)明显小于错配组(493.9,P<0.01)及空转组(505.7,P<0.01).标准4 h 51Cr释放实验中SiRNA-1/ PED的细胞溶解率较空转组分别减少了70%(20%正常人血清组)和60%(40%正常人血清组)(P<0.05).结论 PED在转染SiRNA-1后发生了基因沉默,猪内皮细胞可以成为RNAi作用的靶细胞.本研究为更深层次探讨RNAi在异种移植中的作用奠定了基础.