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摘要:
目的确定端粒酶调节相关hALP基因对细胞DNA损伤的反应和作用.方法以DNA损伤剂H2O2和顺铂处理人HeLa、Hep2细胞,运用定量逆转录-聚合酶链反应和免疫荧光观察hALP 基因表达的改变,并以荧光素酶报告基因法测定hALP基因启动子活性变化. 通过四甲基偶氮唑盐(MTT)法分析不同hALP基因表达状态下DNA损伤剂对细胞生长的影响.结果 0.2~1.6 mmol/L H2O2可诱导hALP mRNA水平升高,当浓度为0.4 mmol/L时,hALP mRNA水平最高;以0.4 mmol/L H2O2处理细胞6 h即可观察到hALP mRNA水平显著升高,并在36 h内保持高水平.顺铂处理细胞也可以上调hALP的mRNA表达,并呈一定的剂量和时间依赖性.免疫荧光检测发现:在0.2或0.4 mmol/L H2O2、0.2或0.5 μmol/L 顺铂处理细胞12 h后,hALP的表达水平升高,并且多聚集于细胞核.H2O2和顺铂处理细胞时可通过hALP基因启动子-705 ~ +20 nt区域的序列上调其启动子转录活性.H2O2(0.4 mmol/L)或顺铂(0.5 μmol/L)处理HeLa细胞时,表达正义hALP基因的细胞生长仍活跃,而表达反义hALP基因和对照组细胞则生长相对缓慢.结论 DNA损伤可通过激活hALP基因启动子转录活性而上调其表达,hALP基因的表达可以增强细胞对H2O2和顺铂损伤的抵抗性.
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文献信息
篇名 DNA损伤剂诱导端粒酶调节相关hALP基因表达及作用研究
来源期刊 中华病理学杂志 学科 医学
关键词 DNA损伤 端粒,末端转移酶 基因表达
年,卷(期) 2005,(11) 所属期刊栏目 实验病理学
研究方向 页码范围 732-736
页数 5页 分类号 R3
字数 4479字 语种 中文
DOI 10.3760/j.issn:0529-5807.2005.11.008
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作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 凌云 齐齐哈尔医学院病理教研室 5 6 1.0 2.0
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研究主题发展历程
节点文献
DNA损伤
端粒,末端转移酶
基因表达
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期刊影响力
中华病理学杂志
月刊
0529-5807
11-2151/R
大16开
北京市西城区宣武门东河沿街69号
2-56
1955
chi
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