RNA干扰真核表达载体pEGFP-H1介导的血管内皮生长因子shRNA治疗人胶质瘤的实验研究

• 作者: 刘如恩 周凤 姜晓兵 张方成 赵洪洋 赵甲山
• 来源期刊: 中华医学杂志
• 关键词: RNA 内皮生长因子 神经胶质瘤 基因疗法
• 年，卷（期）: 2005,（8）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 547-550
• 页数: 4页
• 字数: 2835字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:0376-2491.2005.08.012

摘要

目的构建针对血管内皮生长因子(VEGF)的短发夹环RNA(shRNA)质粒(pEGFP-H1/VEGF),观察其在体内和体外对胶质瘤细胞株U251生长的抑制作用.方法应用PCR构建携带绿色荧光蛋白(EGFP)基因的RNA干扰真核表达载体pEGFP-H1,并利用该载体介导VEGF shRNA.用阳离子脂质体转染U251细胞,通过荧光显微镜和流式细胞仪观察EGFP的表达,用RT-PCR检测VEGF mRNA的表达,以酶联免疫吸附实验(ELISA)检测培养液中VEGF蛋白的含量.同时筛选转染pEGFP-H1和pEGFP-H1/VEGF的U251稳定细胞株,制备裸鼠U251细胞移植瘤模型,观察肿瘤生长情况.结果与空载体转染组相比, pEGFP-H1/VEGF对VEGF的抑制率达77.9%.对照组和pEGFP-H1组裸鼠肿瘤重量分别为1.7 g±0.4 g和1.5 g±0.7 g,体积分别为1573 mm3±330 mm3和1430 mm3±382 mm3,两组之间重量和体积差异均无统计学意义(P>0.05),而pEGFP-H1/VEGF组肿瘤重量为0.5 g±0.4 g,体积为401 mm3±272 mm3,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01).结论 pEGFP-H1介导的VEGF shRNA能有效抑制U251细胞中VEGF的表达,并在体内抑制肿瘤生长.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘如恩	中日友好医院神经外科	26	99	6.0	8.0
2	周凤	深圳市眼科医院一病区	13	52	3.0	7.0