bcr-abl融合基因特异性siRNA对K562细胞生物学特性的影响

• 作者: 于文强 刘飞 孙秉中 尚振川 张孝勇 柴玉波 王莎 谢鑫 贾卫 金伯泉
• 来源期刊: 中华医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 白血病,髓样,慢性 基因融合 K562细胞系
• 年，卷（期）: 2005,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 198-202
• 页数: 5页
• 分类号: R3
• 字数: 4055字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:0376-2491.2005.03.016

摘要

目的应用特异性siRNA(小干涉RNA)抑制慢性粒细胞白血病bcr-abl融合基因表达,观察其对K562细胞生物学特性的影响.方法以慢性粒细胞白血病细胞系K562为研究对象,合成并转染针对K562细胞bcr-abl融合基因融合位点的21nt siRNA,应用Western blot法检测bcr-abl融合基因的表达;3H-TdR掺入法检测K562细胞的增殖活性;Annexin Ⅴ-FITC/PI染色法检测K562细胞的存活状况;流式细胞仪法检测K562细胞周期变化以及联苯胺染色法检测K562细胞的分化状况;应用Western blot法检测凋亡相关蛋白Bcl-xL/Bax的表达.结果 (1)RNA干涉组K562细胞bcr-abl融合基因的表达水平明显下降;(2)RNA干涉组的CPM值(每分钟脉冲数)在siRNA转染K562细胞第24 h, 48 h, 72 h和96 h均明显低于对照组(下降率依次为33.06%,52.25%,57.64%,70.87%),(3)RNA干涉组转染48h时有43.2%的K562细胞发生凋亡;(4)RNA干涉组K562细胞凋亡相关蛋白Bcl-xL的表达水平下调,但Bax的表达无明显变化;(5)RNA干涉组K562细胞联苯胺染色阳性比例增加,部分K562细胞向红系分化;(6)RNA干涉组K562细胞出现明显的G1期阻滞.结论特异性siRNA分子可以显著抑制bcr-abl融合基因的表达,影响K562细胞的基本生物学特性,最终导致K562细胞分化或凋亡.