基因治疗成骨肉瘤的探索:人成骨肉瘤细胞CD147基因编码区克隆和反义RNA表达质粒构建

• 作者: 刘云燕 文艳华 李存孝 杨彤涛 范清宇
• 来源期刊: 中国临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 骨肉瘤 基因表达 质粒
• 年，卷（期）: 2005,（14）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 132-134,插图14-6
• 页数: 4页
• 分类号: R73
• 字数: 4885字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2005.14.084

摘要

目的:构建CD147反义RNA表达质粒载体,探索治疗骨肉瘤侵袭和转移的新方法.方法:实验于2004-05在第四军医大学唐都医院骨肿瘤研究所实施,以人成骨肉瘤细胞系MG63的mRNA为模板,采用反转录聚合酶链反应方法得到人CD147的编码区cDNA,用DNA重组技术将人CD147编码区基因反向克隆到真核表达质粒PcDNA3.1(+)中,构建成CD147反义RNA表达质粒PcDNAasCD147.用阳离子脂质体介导转染人成骨肉瘤细胞系MG63,经G418筛选后获得的克隆进行鉴定. 结果:CD147反义RNA表达质粒载体PcDNAasCD147经限制性酶切及部分序列分析证明基因插入正确.免疫组化SP法染色证实:转染细胞MG63/PcDNAasCD147,与亲本细胞相比,CD147的表达明显下降.结论:成功地从人成骨肉瘤细胞中克隆出CD147编码区基因,构建了CD147反义RNA表达质粒载体PcDNAas CD147,此实验结果为进一步研究CD147蛋白分子的生物学功能以及为成骨肉瘤的基因治疗研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	范清宇	解放军第四军医大学唐都医院骨肿瘤研究所	54	397	12.0	15.0
2	文艳华	解放军第四军医大学唐都医院骨肿瘤研究所	18	149	8.0	11.0
3	杨彤涛	解放军第四军医大学唐都医院骨肿瘤研究所	8	29	4.0	5.0
4	李存孝	解放军第四军医大学唐都医院骨肿瘤研究所	5	8	2.0	2.0
5	刘云燕	解放军第四军医大学唐都医院骨肿瘤研究所	5	30	3.0	5.0