FLIP干扰性小RNA促进大肠癌细胞的凋亡

• 作者: 孙保存 张诗武 牛瑞芳 臧凤琳 赵秀兰 魏熙胤
• 来源期刊: 世界华人消化杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 大肠癌 FLIP siRNA 凋亡
• 年，卷（期）: 2005,（13）
• 所属期刊栏目: 大肠癌
• 页码范围: 1519-1523
• 页数: 5页
• 分类号: R73
• 字数: 5015字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-3079.2005.13.008

摘要

目的:研究对应FLIP基因的siRNA片段对大肠癌细胞株HT-29凋亡的影响,明确FLIP在Fas介导的凋亡途径中的作用.方法:体外培养大肠癌细胞HT-29,通过电穿孔技术将特异性siRNA片段转染入细胞,半定量RT-PCR法判断干扰前后FLIP mRNA水平的变化,分析RNA干扰的特异性、时效性,并比较对应不同位点的两个siRNA片段对FLIP的干扰效果.经凋亡诱导型抗体激活后,以Annexin V染色法及DNA降解片段检测分析干扰前后HT-29细胞对Fas介导的凋亡敏感性的改变.结果:特异性siRNA片段能有效降低FLIP mRNA水平,最大干扰效率达65.02%,明显高于作为对照的非相关片段;干扰作用于转染后24 h即可出现,48 h达高峰,72 h稍有降低;对应不同位点的两个siRNA片段对FLIP均可产生干扰作用,彼此间差别不大.在诱导型抗体的刺激下,与未转染细胞相比,转染siRNA的HT-29细胞中凋亡细胞所占比例明显增加.结论:特异性siRNA片段可显著降低FLIP基因mRNA的表达水平,并提高HT-29细胞对Fas介导的凋亡敏感性.以FLIP为靶点的RNA干扰技术可望成为大肠癌基因治疗的新方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙保存	天津医科大学肿瘤研究所	180	1326	16.0	27.0
2	赵秀兰	天津医科大学病理教研室	136	1103	15.0	26.0
3	牛瑞芳	天津医科大学肿瘤研究所	54	466	11.0	19.0
4	张诗武	天津医科大学肿瘤研究所	41	386	10.0	18.0
5	魏熙胤	天津医科大学肿瘤研究所	19	232	7.0	15.0
6	臧凤琳	天津医科大学肿瘤研究所	6	29	3.0	5.0