Toll样受体在人眼角膜上皮和永生化人角膜上皮细胞系的表达及功能研究

• 作者: 吴欣怡 高建鲁
• 来源期刊: 中华医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 上皮,角膜 角膜疾病 角膜炎 基因表达
• 年，卷（期）: 2005,（32）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 2269-2273
• 页数: 5页
• 分类号: R77
• 字数: 3823字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:0376-2491.2005.32.011

摘要

目的探讨Toll样受体( TLR)1～9在人眼角膜上皮和上皮细胞系的表达及其功能性.方法以健康人外周血单个核细胞(PBMC)为阳性对照,收集20例健康青年人角膜上皮标本和培养永生化人角膜上皮细胞系(THCE)细胞,用半定量反转录聚合酶链反应检测TLR1～9 mRNA表达; Western 印迹检测TLR2、4的蛋白质表达;TLR3和TLR4的配体对THCE刺激后酶联免疫检测分泌IL-8的变化,结合抗体封闭实验,研究角膜上皮TLR的功能性.结果与PBMC比较,人角膜上皮强表达TLR1、2、3、5、6、9,弱表达TLR8,微弱表达TLR4; 20例角膜上皮标本中发现1例TLR3、4、6、8阴性表达,1例TLR5微弱表达;人角膜上皮在蛋白质水平表达TLR2、4;THCE细胞与人角膜上皮有相似的TLR表达谱;LPS和PolyI:C刺激THCE 1、4、8 h 后IL-8分泌增加,8 h 时分别达到对照组的10倍和7倍(均P<0.05),抗体封闭TLR4可以阻断LPS诱导的IL-8分泌.结论人角膜上皮表达TLR1～9,但不同TLRs表达水平有差异.THCE是研究人角膜上皮TLR表达和功能的良好细胞系.