Her-2/neu小分子干扰RNA对肺腺癌细胞周期和凋亡机制的影响

• 作者: 任淑华 张林 王井伟
• 来源期刊: 中华医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肺肿瘤 细胞周期 脱噬作用 Her-2/neu
• 年，卷（期）: 2005,（22）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1530-1534
• 页数: 5页
• 分类号: R3
• 字数: 4231字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:0376-2491.2005.22.006

摘要

目的研究人类表皮生长因子受体-2(Her-2/neu)小分子干扰RNA(siRNA)对Her-2/neu过表达的肺腺癌细胞的细胞周期和凋亡机制的影响.方法用化学合成的靶向Her-2/neu siRNA转染肺腺癌calu-3细胞,转染前后通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定细胞中Her-2/neu、细胞周期蛋白(Cyclin)D1 mRNA水平;流式细胞术检测Her-2/neu蛋白水平和细胞周期的变化;AnnexinⅤ异硫氢酸荧光素(FITC)试剂盒检测肺癌细胞的凋亡情况;荧光分光光度法测定Caspase-3活性;酶联免疫吸附试验(ELISA)技术检测培养液上清中血管内皮生长因子(VEGF)水平.结果 Her-2/neu siRNA能在mRNA和蛋白水平下调肺癌细胞株calu-3中Her-2/neu基因的表达.calu-3细胞转染Her-2/neu siRNA 48 h后处于G0/G1期的细胞增多,同时S期的细胞比例减少,与未转染对照组、空载体组和非特异性siRNA组比较差异有统计学意义(F=6.1,P<0.01).转染Her-2/neu siRNA后Cyclin D1 mRNA水平下降,同时培养上清液中的VEGF含量为176 pg/ml±6 pg/ml(F=24.7,P<0.01),Caspase-3活性为135%±4%(F=8.9,P<0.01),细胞凋亡率为25.1%±1.2%(F=10.3,P<0.01). 结论化学合成的靶向Her-2/neu siRNA能够下调Her-2/neu基因表达,继而降低Cyclin D1和VEGF水平,激活Caspase-3途径,从而阻滞细胞周期于G0/G1期和诱导凋亡.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王井伟	唐山工人医院骨外科	4	25	3.0	4.0