膀胱癌T-24细胞系中细胞角蛋白20的分离纯化及鉴定

• 作者: 刘彦慧 吴小候 罗春丽 蔡晓钟
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 细胞角蛋白20 分离纯化 阴离子交换层析 人类膀胱癌T-24细胞
• 年，卷（期）: 2005,（4）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 302-305
• 页数: 4页
• 分类号: Q503|Q512.6|R392-33
• 字数: 3757字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-5404.2005.04.007

摘要

目的分离纯化细胞角蛋白20(Cytokeratin20, CK20)并加以鉴定,为进一步研制抗CK20单克隆抗体奠定基础.方法培养人膀胱肿瘤T-24细胞系并用免疫组化检测CK20表达,然后大量培养并收集细胞,超声波细胞粉碎后,先用萃取、高速离心、透析等方式进行蛋白初分离,然后利用以DE52为介质的阴离子交换层析分离纯化CK20蛋白,以电泳示踪,最后采用SDS-PAGE、HLPC和Western-blotting加以鉴定.结果在阴离子交换层析时出现3组洗脱峰,CK20主要存在第二组峰中,该峰在SDS-PAGE和Western-blotting上均呈现单一条带,HLPC分析显示CK20蛋白主峰呈正态分布,仅见一个较低峰度的蛋白质杂峰.结论该纯化方法简便、可行、效果好、获得的蛋白纯度高,提取的蛋白可确认为CK20 并且具有较高的免疫生物活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴小候	重庆医科大学检验系实验诊断学教研室	234	955	14.0	18.0
2	罗春丽	重庆医科大学检验系实验诊断学教研室	119	493	12.0	15.0
3	蔡晓钟	重庆医科大学检验系实验诊断学教研室	32	94	5.0	7.0
4	刘彦慧	重庆医科大学检验系实验诊断学教研室	4	14	2.0	3.0