摘要:
目的:采用补肾中药(鹿茸及骨碎补等)血清在体外培养人成骨细胞,观察其对成骨细胞分化增殖以及骨钙素水平的影响.方法:实验于2004-06/12在南方医科大学南方医院完成.SD系雄性大鼠4只,分为4组.分别灌服(以生药量计量)高浓度7.08 g/mL、中浓度3.54 g/mL、低浓度1.77 g/mL的补肾中药,2次/d,每次2 mL/只,对照组灌服等量生理盐水,连续灌胃3 d,末次灌胃后2 h在无菌条件下抽取分离大鼠血清,标记为补肾中药高、中、低浓度血清和对照血清.成人髂骨松质骨取材于南方医院脊柱骨科知情同意手术者.采用胰蛋白酶和胶原酶消化法,分离培养后取第3代人成骨细胞,分别加入含有高、中、低不同浓度补肾中药的大鼠血清培养48 h.成骨细胞增殖及分化状况以流式细胞仪检测;成骨细胞分化的早期标记碱性磷酸酶活性以化学比色法检测,反映骨吸收及骨形成指标的骨钙素含量以放射免疫法检测.结果:进入统计分析的大鼠保持为4只,无缺失值.①成骨细胞细胞增殖指数:经高、中、低浓度补肾中药血清干预组明显高于对照组(27.96±5.43,30.78±5.05,23.91±5.75,18.53±3.91,P<0.01),以中浓度补肾血清作用更明显.②成骨细胞的碱性磷酸酶活性(金氏单位):高、中、低3种浓度补肾中药血清干预组明显高于对照组(42±0.8,38±1.1,31±0.9,13±1.2,P<0.01),以高浓度补肾血清作用最明显,且呈剂量依赖性.③骨钙素检测显示:高、中、低3种不同浓度的补肾中药血清组含量显著高于对照组[(4.7±0.5),(4.4±0.7),(3.2±0.4),(1.9±0.2)mg/L,P<0.01],且呈剂量依赖性.结论:补肾中药血清能促进成骨细胞增殖分化,提高碱性磷酸酶活性,增强骨钙素分泌而促进骨形成,在实验浓度内呈剂量依赖性.