体外诱导恒河猴皮肤干细胞分化为结膜上皮细胞的实验研究

• 作者: 卢蓉 彭展 王智崇 葛坚 高楠 魏雁涛 黄丹平 黄冰
• 来源期刊: 中华医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 皮肤 干细胞 可塑性
• 年，卷（期）: 2005,（36）
• 所属期刊栏目: 干细胞基础研究
• 页码范围: 2554-2558
• 页数: 5页
• 分类号: R3
• 字数: 5125字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:0376-2491.2005.36.014

摘要

目的诱导体外培养、纯化的恒河猴皮肤干细胞向结膜上皮细胞分化,探索皮肤干细胞的可塑性.方法体外培养恒河猴皮肤干细胞,用Ⅳ型胶原纯化,纯化前后用流式细胞仪检测β1整合素和角蛋白15阳性细胞比例,纯化后的皮肤干细胞用细胞免疫荧光和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术鉴定β1整合素和角蛋白15.皮肤干细胞转染绿色荧光蛋白基因,24 h后挑选出有荧光的细胞,与人结膜上皮细胞共培养10 d,再进行结膜上皮细胞的特异性抗原黏蛋白4和角蛋白4的鉴定,检测方法包括细胞免疫荧光和RT-PCR.结果体外培养的皮肤干细胞纯化后比例接近90%.细胞免疫荧光和RT-PCR检测β1整合素和角蛋白15阳性.转染绿色荧光蛋白基因24 h后,细胞呈现绿色荧光,与结膜上皮细胞共培养10 d后,细胞免疫荧光和RT-PCR检查黏蛋白4和角蛋白4阳性.结论在体外培养纯化的灵长类动物恒河猴皮肤干细胞,在适宜条件下,可诱导分化为有结膜上皮细胞特征的细胞.