腺病毒介导BTEB2反义RNA对血管平滑肌细胞增殖的抑制作用

• 作者: 何国祥 唐兵 唐波 李德
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: BTEB2 反义RNA 腺病毒载体 血管平滑肌细胞
• 年，卷（期）: 2005,（5）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 388-391
• 页数: 4页
• 分类号: R322.12|R329.28|R394-33
• 字数: 2493字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-5404.2005.05.005

摘要

目的构建携带反义锌指转录因子2(basic transcription element binding protein 2,BTEB2)基因的重组腺病毒载体并研究BTEB2反义RNA对平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)增殖的影响.方法从培养的大鼠VSMC中提取总RNA,通过RT-PCR制备BTEB2 cDNA,将其反向克隆至腺病毒载体,构建携带反义BTEB2基因的重组腺病毒Ad.ASBTEB2;用Ad.ASBTEB2转染VSMC,通过RT-PCR检测BTEB2反义RNA在VSMC中的表达;经免疫印迹法分析BTEB2反义RNA对BTEB2蛋白质表达的抑制作用;通过MTT比色法和流式细胞仪分别检测BTEB2反义RNA对VSMC增殖及细胞周期的影响.结果构建的重组腺病毒载体经鉴定正确,其滴度为5×10 9/ml;VSMC被重组腺病毒感染后,可检测到BTEB2反义RNA的表达;Ad.ASBTEB2转染可明显抑制VSMC的BTEB2蛋白表达及血清诱导的VSMC增殖,使VSMC出现明显的G0/G期阻滞.结论成功构建了携带反义BTEB2基因的重组腺病毒载体;重组腺病可在VSMC中表达BTEB2反义RNA;BTEB2反义RNA对VSMC增殖有明显的抑制作用.