重组1和2型腺相关病毒转导增强绿色荧光蛋白在大鼠脑中的表达

• 作者: 孔燕国 张振兴 张波 扈国杰 李桂林 栗世方 王任直 田宇 窦万臣 顾建刚 魏俊吉 魏宇魁
• 来源期刊: 中华医学杂志
• 关键词: 腺相关病毒 增强绿色荧光蛋白 脑 基因表达
• 年，卷（期）: 2005,（8）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 542-546
• 页数: 5页
• 字数: 4077字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:0376-2491.2005.08.011

摘要

目的探讨重组1、2型腺相关病毒(rAAV1和rAAV2)载体经不同途径向大鼠脑转入增强绿色荧光蛋白(EGFP)报告基因的表达情况,选择更加适于中枢神经系统(CNS)转基因治疗的rAAV血清型和可行的基因转入途径.方法将24只雄性健康成年SD大鼠随机分为4组:rAAV1海马注射组、rAAV1脑室注射组、rAAV2海马注射组和rAAV2脑室注射组,每组6只大鼠.对每组大鼠立体定向注射剂量和滴度相匹配的rAAV1-EGFP和rAAV2-EGFP载体,分别于注射后2周和4周处死大鼠取脑,行序列冰冻切片并以荧光显微镜观察EGFP在脑内的表达情况,计算EGFP在脑的表达体积.结果 2周时各组小鼠EGFP表达量少或无表达,差异无统计学意义;4周时rAAV1海马注射组表达体积为(7.00±0.98)mm3,rAAV2海马注射表达体积为(0.81±0.28)mm3(P<0.01);4周时AAV1脑室注射组表达体积为(12.72±0.28)mm3,烫AAV2脑室注射组表达体积为(0.24±0.13)mm3(P<0.001).结论在CNS中rAAV1是一种比rAAV2更为优越的转基因载体,rAAV1可通过脑室内注射途径在CNS高表达,并可直接转导胶质细胞.