人淋巴细胞趋化因子真核表达质粒的构建及其在细胞中的表达

• 作者: 叶章群 周四维 宋晓东 张旭 杨为民 鲁雄兵
• 来源期刊: 中国现代医学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 淋巴细胞趋化因子 克隆 真核表达
• 年，卷（期）: 2005,（8）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1125-1128,1132
• 页数: 5页
• 分类号: Q987.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-8982.2005.08.002

摘要

目的构建人淋巴细胞趋化因子(human lymphotactin,hLptn)真核表达质粒,并在膀胱肿瘤细胞株BIU-87中的表达重组质粒.方法用RT-PCR法自活化的人外周血淋巴细胞扩增hLptn的含编码区序列的cDNA,克隆至pGM-T Easy T载体,测序正确后,将目的片段插入pcDNA3.1(+)载体,获得阳性克隆pcD-NA3.1(+)-hLptn,用脂质体将其转染BIU-87细胞,经G418筛选稳定表达克隆,用免疫荧光染色技术鉴定经筛选的克隆.结果克隆的cDNA序列与GenBank中U23772的序列编码区内第225位碱基不同,系同义突变;构建了真核重组表达载体pcDNA3.1(+)-hLptn;筛选获得了稳定表达转染hLptn的BIU-87细胞株.结论成功构建的hLptn真核表达系统可在人膀胱肿瘤细胞株BIU-87中稳定表达,为研究hLptn基因介导的人膀胱肿瘤特异性主动免疫治疗奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周四维	华中科技大学同济医学院附属同济医院泌尿外科	178	1298	18.0	27.0
2	叶章群	华中科技大学同济医学院附属同济医院泌尿外科	497	4467	31.0	47.0
3	张旭	华中科技大学同济医学院附属同济医院泌尿外科	84	1091	16.0	31.0
4	杨为民	华中科技大学同济医学院附属同济医院泌尿外科	226	1320	17.0	26.0
5	宋晓东	华中科技大学同济医学院附属同济医院泌尿外科	57	204	7.0	12.0
6	鲁雄兵	华中科技大学同济医学院附属同济医院泌尿外科	13	83	5.0	9.0