摘要:
背景:研究证实,热休克蛋白70家族的蛋白质对细胞有保护作用.氯胺酮可导致患者出现幻觉、谵妄等精神症状,可对大鼠边缘系统神经元产生损害,在这些受损的神经元内用免疫组化染色方法可检测到热休克蛋白70的表达.目的:观察不同剂量的氯胺酮在不同年龄大鼠海马中诱导热休克蛋白70的表达,探讨氯胺酮对神经损害的作用.设计:随机对照实验.单位:四川大学华西医院麻醉学与危重医学教研室.材料:实验于2000-01/05在四川大学华西医院麻醉学与危重医学教研室实验室完成.选择SD大鼠70只,雌雄不限,清洁级.方法:35只成年SD大鼠随机分为对照组和氯胺酮20.0,40.0,60.0,80.0,100.0,120.0 mg/kg 6个实验组,每组5只,分别给予生理盐水和氯胺酮20.0,40.0,60.0,80.0,100.0,120.0 mg/kg腹腔内注射.另取0~10,11~20,21~30,31~45,46~60,61~90,91~120 d年龄阶段大鼠35只,每个年龄段5只,分别腹腔内注射氯胺酮80.0 mg/kg.给药后正常喂养24 h后,在麻醉状态下快速断头取脑,于海马取5 μm冠状切面切片,应用免疫组化染色检测大鼠海马中热休克蛋白70的表达.主要观察指标:大鼠海马热休克蛋白70阳性细胞百分率、密度和灰度值.结果:70只大鼠均进入结果分析.①不同剂量氯胺酮对大鼠脑海马区热休克蛋白70表达:对照组,20.0,40.0,60.0,80.0,100.0,120.0mg/kg剂量氯胺酮组诱导热休克蛋白70表达的阳性细胞密度分别为0,8.12±1.82,27.07±5.98,45.35±5.84,78.51±7.34,74.16±8.17,60.84±6.27.可见氯胺酮剂量在80.0 mg/kg以内,随剂量的增加,热休克蛋白70阳性细胞密度显著增加(P<0.01);氯胺酮剂量在80.0mg/kg以上,随剂量的增加,热休克蛋白70阳性细胞密度显著降低(P<0.01).②氯胺酮对不同年龄段大鼠脑海马区热休克蛋白70表达:20 d以下的幼鼠神经细胞热休克蛋白70阳性细胞密度为0;在21~30 d,31~45 d,46~60 d,61~90 d大鼠海马中热休克蛋白70阳性细胞密度分别为34.17±6.18,55.42±4.80,78.51±7.34,83.16±11.10,与前一年龄组相比,随着年龄的增加,热休克蛋白70阳性细胞密度显著增加(P<0.01);61~90 d和91~120 d大鼠海马中热休克蛋白70阳性细胞密度分别为83.16±11.10和85.83±9.33(P>0.05).结论:氯胺酮可诱导热休克蛋白70在大鼠脑海马区表达,提示海马区的神经元可能受到损害;随剂量的增加,其损害作用加强;氯胺酮对成年大鼠的脑损害作用大于幼鼠.