聚合酶联法检测产毒素霍乱弧菌

• 作者: 刘念一 刘琪 安永群 李坤碧 韩力苏
• 来源期刊: 现代医药卫生
• 学科: 医学
• 关键词: 霍乱弧菌 CT毒素 快速检测 PCR
• 年，卷（期）: 2005,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 22-23
• 页数: 2页
• 分类号: R446
• 字数: 3594字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-5519.2005.01.016

摘要

目的:研究快速、特异、灵敏的检测携带肠毒素基因的霍乱弧菌的聚合酶链法检测技术,应用于突发霍乱疫情现场和各类食品样本中霍乱弧菌的的快速检测.方法:选择霍乱弧菌肠毒素基因上的CTBAB亚单位中稳定区的核苷酸序列制备成霍乱毒素的特异性引物,对O1群(稻叶、小川)、O139群霍乱弧菌标准菌株及本地流行株和60份可疑样本检测,进行PCR实验.通过稀释比较法和定时增菌培养检测法,将PCR方法与培养法、免疫胶体金膜层析法的灵敏性与特异性进行比较.结果:细菌经稀释10-1～10-6以后仍PCR检测阳性,PCR的检测灵敏度为1个DNA考贝.免疫胶体金膜层析法的检测限为106/ml,并存在一定程度的假阳性.霍乱标准菌株均在546bp处出现CTBAB亚单位基因扩增产物,可疑样本均未检测CTBAB亚单位基因产物,与培养结果符合.选择其他肠道传染病病原菌进行特异性实验,证实霍乱弧菌CTBAB亚单位基因引物的特异性,应用常规培养法、一次性快速纸片法、3种方法对60份可疑样本检测证实,PCR方法的特异性与培养法一致,PCR法的特异性超过免疫胶体金膜层析法.检测灵敏度实验该引物对霍乱弧菌的检测敏感基线为1个DNA考贝.结论:该实验整个过程仅需4～6小时,适用于疫情现场对霍乱弧菌的快速仪器检测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	韩力苏		8	60	3.0	7.0
2	刘琪		9	29	3.0	4.0
3	安永群		5	31	2.0	5.0
4	李坤碧		8	35	3.0	5.0
5	刘念一		2	4	1.0	2.0