AdrhBMP-2转染兔骨骼肌干细胞体外诱导成骨修复骨缺损的实验

• 作者: 伍骥 卢世璧 尚咏
• 来源期刊: 中国临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 骨/损伤 骨形态发生蛋白质类 基因疗法 干细胞
• 年，卷（期）: 2005,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 74-76
• 页数: 3页
• 分类号: R329.2
• 字数: 5423字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2005.06.038

摘要

目的:评价腺病毒介导的重组人骨形态发生蛋白(AdrhBMP-2)基因对兔骨骼肌干细胞(skeletal muscle stem cells,SMSCs)体外成骨活性的影响,为临床应用于修复骨缺损提供实验依据.方法:实验于2002-04/07在解放军总医院骨科研究所完成.腺病毒介导的基因转染和检测:在293细胞内扩增AdrhBMP-2及AdGFP,并用空斑形成实验测定滴度.实验分为3组:AdrhBMP-2转染细胞组,AdGFP转染细胞组,未转染细胞组.从兔后肢股部骨骼肌内分离培养的干细胞经腺病毒转染后(MOI=50)观察转染率和转染后细胞生物学的变化.腺病毒编码的rhBMP-2基因转染SMSCs后检测重组人骨形态发生蛋白(rhBMP)-2、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、Ⅰ型胶原和骨钙素的表达及钙结节的形成.结果:①腺病毒基因转染率为79%;SMSCs转染基因后3 d增殖减慢,然后缓慢上升,7 d进入增殖平缓期.②转染后第5天,免疫组化染色显示AdrhBMP-2转染细胞组rhBMP-2阳性、ALP阳性、Ⅰ型胶原阳性,细胞转染AdGFP组和未转染细胞组上述指标染色呈弱阳性.③AdrhBMP-2转染细胞后1-3 d即开始表达rhBMP-2,13～15 d达高峰,19～21d表达量明显减少.④AdrhBMP-2转染后第5天,ALP分泌量及骨钙素含量明显高于其他两组,差异有显著性意义(P＜0.05).⑤AdrhBMP-2转染后第21天染色显示钙结节,其他两组未见钙结节形成.结论:①SMSCs取材易、来源广、增殖迅速.②AdrhBMP-2基因转染率较高,经其转染SMSCs有较强的诱导成骨能力,可成为一种新颖的修复大范围骨缺损的治疗方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	卢世璧	解放军总医院骨科	204	1711	21.0	30.0
2	尚咏	解放军空军总医院骨科	6	16	2.0	3.0
3	伍骥	解放军空军总医院骨科	17	48	4.0	6.0