构建Neuregulin1克隆载体的实验

• 作者: 于旸 傅松滨 史忠诚 张际绯 金连弘
• 来源期刊: 中国临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 逆转录聚合酶链反应 异构现象 质粒
• 年，卷（期）: 2005,（15）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 117-119
• 页数: 3页
• 分类号: R318
• 字数: 3880字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2005.15.061

摘要

目的:Schwann细胞具有促进神经元再生的作用,Neuregulin1(NRG1)具有促进神经元再生和Schwann细胞增殖的效应,构建NRG1克隆载体,可为下一步建立NRG1转染的Schwann细胞系,对神经损伤模型进行Schwann细胞移植,观察其对神经损伤的修复作用提供重要实验方法.方法:实验于2003-09/2004-01在哈尔滨医科大学医学遗传学研究室完成.提取幼龄大鼠脑RNA,反转录聚合酶链反应,用XbaI和EcoRI对目的基因和载体质粒进行双酶切,T4连接酶连接Schwann后转化Top10感受态大肠杆菌,挑取LB(Amp+)平板生长克隆菌摇菌扩增,用菌液扩增聚合酶链反应检测目的基因,同时提取质粒与空载体并列电泳验证克隆质粒,进行克隆载体测序.结果:获得一株NRG1克隆质粒,测序结果显示为NRG1新的异构体,用基因组DNA和cDNA为模板扩增聚合酶链反应验证是NRG1新的剪切体.结论:构建的NRG1克隆异构体是大鼠NRG1基因克隆载体,可用于进一步的细胞转染、蛋白表达功能检测和细胞移植研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	傅松滨	哈尔滨医科大学医学遗传学教研室	206	912	13.0	19.0
2	金连弘	哈尔滨医科大学组织学与胚胎学教研室	59	263	8.0	12.0
3	史忠诚	哈尔滨医科大学医学遗传学教研室	10	51	4.0	7.0
4	于旸	哈尔滨医科大学医学遗传学教研室	37	103	5.0	8.0
5	张际绯	哈尔滨医科大学组织学与胚胎学教研室	2	1	1.0	1.0