凋亡抑制基因survivin反义寡核苷酸联合bcl-2反义寡核苷酸诱导肺癌细胞株凋亡的实验观察

• 作者: 夏雪梅 李殿明 胡俊锋 蔡映云 陈余清 黄礼年
• 来源期刊: 中国临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 肺肿瘤 寡核苷酸类,反义 基因,bcl-2 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2005,（47）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 69-71
• 页数: 4页
• 分类号: R734.2
• 字数: 5079字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2005.47.034

摘要

目的:探讨凋亡抑制基因survivin反义寡核苷酸单用或联用bcl-2反义寡核苷酸对肺癌细胞株的作用,探讨其在抗癌方面的作用.方法:①实验于2002-08/2003-04在蚌埠医学院免疫学实验室完成.将对数生长期NCI-H446细胞分为6组:空白对照组,脂质体10mg/L组(仅加空脂质体),NSODN 500nmol/L组(该3组均为对照组),survivin反义寡核苷酸500 nmoL/L组,bcl-2反义寡核苷酸5 μmol/L,survivin反义寡核苷酸500nmol/L+bcl-2反义寡核苷酸5 μmol/L组(分别在脂质体介导下转染不同寡核苷酸,48h后收取细胞进行以下检测).②在脂质体介导下,以survivin的反义寡核苷酸作用于肺癌细胞株NCI-H446和SPC-A1,于72 h用反转录聚合酶链反应检测survivin mRNA表达.凋亡指数=(静止期/DNA合成前期)占整个细胞周期的百分比;增殖指数=(DNA复制期+合成后期/有丝分裂期)占整个细胞周期的百分比.②survivin反义寡核苷酸单独或联合bcl-2反义寡核苷酸作用NCI-H446后,用四甲基偶氮唑盐法检测细胞生长抑制率并计算两药相互作用指数,锥虫蓝拒染实验检测细胞死亡率.③计量资料差异性比较采用方差分析和q检验.结果:①两种肺癌细胞株皆表达survivin基因.survivin反义寡核苷酸作用细胞株后,出现生长抑制和细胞凋亡,细胞survivin mRNA明显下调,反义寡核苷酸500nmol/L作用72 h后NCI-H446和SPC-A1细胞survivin mRNA抑制率分别达62.72%和67.43%.②四甲基偶氮唑盐法检测结果显示,survivin反义寡核苷酸和bcl-2反义寡核苷酸单独应用对NCI-H446细胞均有生长抑制作用;联合应用survivin反义寡核苷酸和bcl-2反义寡核苷酸的细胞生长抑制率为64.9%,优于单独应用(单用bcl-2反义寡核苷酸为34.2%)(P＜0.01),两药相互作用指数为0.708.锥虫蓝拒染实验显示,survivin反义寡核苷酸500 nmol/L+bcl-2反义寡核苷酸5μmol/L组细胞死亡率为62.1%,高于两药单用时的31.4%和41.4%.流式细胞仪检测凋亡显示,与各对照组相比,survivin反义寡核苷酸和bcl-2反义寡核苷酸均可诱导细胞凋亡,凋亡率分别为43.6%和30.7%,两者联用凋亡率提高到58.6%(P＜0.01).结论:①survivin反义寡核苷酸能抑制肺癌细胞株survivin基因表达,并诱导细胞凋亡和抑制生长.②survivin反义寡核苷酸联合bcl-2反义寡核苷酸具有显著协同抗癌作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈余清	蚌埠医学院附属医院肺科	108	438	8.0	14.0
2	蔡映云	复旦大学附属中山医院肺科	376	2515	22.0	35.0
3	胡俊锋	蚌埠医学院附属医院肺科	40	215	7.0	13.0
4	黄礼年	蚌埠医学院附属医院肺科	53	173	7.0	9.0
5	夏雪梅	蚌埠医学院附属医院肺科	28	185	7.0	12.0
6	李殿明	蚌埠医学院附属医院肺科	38	186	5.0	13.0