人胰岛素样生长因子1真核细胞表达质粒的构建及其稳定表达细胞株的建立

• 作者: 付士波 付长峰 刘一 张绍坤
• 来源期刊: 中国临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 脊髓损伤 细胞凋亡 胰岛素样生长因子1 转染
• 年，卷（期）: 2005,（47）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 49-51
• 页数: 3页
• 分类号: R654.2
• 字数: 4427字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2005.47.024

摘要

目的:构建胰岛素样生长因子1(insulin growth factor 1,IGF-1)的真核细胞表达质粒,转染神经胶质瘤细胞(C6细胞),建立hIGF-1稳定表达细胞株,为进一步观察胰岛素样生长因子1基因体内转染后对脊髓损伤后神经细胞凋亡的影响打下基础.方法:实验于2004-05/09在吉林大学公共卫生学院放射生物实验室进行.用聚合酶链反应方法从人的肝细胞cDNA文库中克隆出IGF-1cDNA,然后定向插入真核细胞表达载体pcDNA3.1中,酶切电泳和基因测序鉴定插入质粒的hIGF-1基因序列;使用C6细胞株,用脂质体方法转染C6细胞.经G418筛选,形成阳性细胞克隆.继续培养4周,进行Western b1ot检测.结果:重组的真核细胞表达质粒pcDNA3.1-hIGF-1所含的IGF-1cDNA序列和插入方向均正确.Western blot检测结果证实转染的hIGF-1基因在C6细胞内成功表达.结论:实验所构建的重组真核细胞表达载体pcDNA3.1-hIGF-1能够稳定表达有活性的hIGF-1,实验结果对进一步观察脊髓损伤后胰岛素样生长因子1抑制神经细胞凋亡的作用有一定意义.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘一	吉林大学第一医院骨科	69	398	11.0	16.0
2	付士波	吉林大学公共卫生学院卫生部放射生物重点实验室	25	108	7.0	9.0
3	付长峰	吉林大学第一医院骨科	31	103	6.0	8.0
4	张绍坤	吉林大学第一医院骨科	2	2	1.0	1.0