摘要:
目的:探讨小站台水环境对小鼠血清糖皮质激素水平、胸腺5-羟色胺含量的变化及胸腺细胞的破坏、凋亡的影响,以及加味逍遥丸调节作用.方法:实验于2003-03/12在江西中医学院附属医院临床检验中心完成.选择10月龄昆明种小鼠,随机分为14组:应激72 h组;应激72 h给药组;应激48 h组;应激48 h给药组;应激24 h组;应激24 h给药组;应激12 h组;应激12 h给药组;应激8 h组;应激8 h给药组;应激4 h组;应激4 h给药组;正常对照组;正常对照给药组.每组10只.利用小站台水环境诱发慢性持续性应激模型,观察不同应激时间小鼠站台前后胸腺质量及组织指数、血清糖皮质激素含量、胸腺5-羟色胺含量、胸腺细胞凋亡状况,以及加味逍遥丸在不同时间不同层次的调节作用.结果:参加实验小鼠140只,全部进入结果分析.①胸腺质量和脾质量:应激24 h,48 h,72 h组均比对照组显著降低(P<0.001或P<0.01);应激72 h给药组与相对应应激组相比显著升高[(71.34±10.52),(57.75±9.17)g,P<0.01];[(70.28±9.05),(58.75±7.72)g,P<0.01];应激48 h给药组脾质量与相对应应激组相比也显著升高[(75.51±5.05),(64.75±6.22),P<0.01].②胸腺指数和脾指数:应激48 h、72 h组小鼠显著低于对照组(P<0.001或P<0.01).应激72 h给药组与相对应应激组相比增高[(3.02±0.42),(2.21±0.42),P<0.01];[(2.97±0.12),(2.36±0.34),P<0.01].③小鼠血清糖皮质激素含量:应激12 h,24h,48 h,72 h组与对照组相比明显提高(P<0.001或P<0.01),应激72 h给药组与应激72 h组相比显著降低[(19.16±5.06),(23.29±4.64)g/L,P<0.01].④小鼠胸腺组织、脾组织5-羟色胺含量:应激8 h,12 h,24h,48 h,72 h组胸腺5-羟色胺含量比对照组显著提高((P<0.001或P<0.05);应激48 h,72h组脾组织5-羟色胺含量比对照组显著提高(P<0.001或P<0.01),应激72 h给药组与相对应激组相比有所降低[(2.15±0.31),(2.91±0.25)μg/g,P<0.001];[(6.05±2.08),(7.96±1.70)μg/g,P<0.05].⑤荧光显微镜观察TFAR19蛋白(绿色荧光)出现百分率:应激4 h,8 h,12 h,24 h,48 h组高于对照组(P<0.001或P<0.05),并在应激12 h组达最高峰.应激72h组反而下降.应激72 h给药组与应激72 h组有所提高[(9.15±4.34),(4.20±7.71)%,P<0.05].⑥Annexin-V凋亡蛋白(绿色荧光)出现的百分数:通过异硫氰酸和碘化吡啶的定染作用,检测不同应激时间Annexin-V胸腺细胞凋亡的变化,凋亡细胞染成绿色,死亡细胞和凋亡晚期细胞染成红色.应激8 h、12 h24h、48 h、72 h组显著高于对照组(P<0.001或P<0.05).应激72 h给药组比应激72 h组降低[(42.65±8.76),(55.95±10.75)%,P<0.01].⑦流式细胞仪检测TFAR19蛋白平均荧光度值:应激4 h,8 h,12 h,24 h,48 h,72 h组高于对照组,应激12 h组达最高峰.应激72 h给药组显著低于相对应应激组[(6.87±3.01),(9.28±3.47),P<0.05].⑧流式细胞仪检测Annexin-V单阳性细胞和双阳性细胞:应激8 h,12 h,24 h,48 h,72 h组比对照组增多.应激72 h给药组Annexin-V与相对应应激组相比有所降低[(17.61±1.31),(19.42±1.62)%,P<0.01]. 结论:随应激时间的加长,小鼠胸腺组织的5-羟色胺,血清糖皮质激素含量、Annexin-V调亡蛋白出现的百分率逐渐升高,胸腺指数逐渐下降.应激12 h组TFAR19凋亡相关蛋白出现百分率达高峰.应激通过神经内分泌网络影响胸腺组织,并对免疫系统起作用,可促进胸腺细胞产生TFAR19凋亡相关蛋白,从而加速胸腺细胞的凋亡.加味逍遥丸可调节应激对胸腺的损伤而起到保护作用.