大鼠转化生长因子β1基因转染成骨细胞后的表达

• 作者: 刘勇 杜靖远 杨述华 段德宇 郑启新 郭晓东
• 来源期刊: 中国临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 转化生长因子β1 成骨细胞 转染 基因表达
• 年，卷（期）: 2005,（26）
• 所属期刊栏目: 组织工程研究
• 页码范围: 232-234
• 页数: 3页
• 分类号: R318
• 字数: 1406字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2005.26.051

摘要

背景:将生物材料复合细胞因子基因,或复合转入细胞因子基因的细胞植入骨缺损处可以促进骨修复.目的:观察将大鼠转化生长因子β1基因转染成骨细胞后进行骨缺损基因治疗的可行性.设计:对照观察实验.单位:华中科技大学同济医学院附属协和医院骨科.对象:新生SD大鼠5只,雌雄不限.方法:实验于2000-02/09在华中科技大学同济医学院附属协和医院骨科实验室完成.通过脂质体介导将转化生长因子β1基因导入大鼠成骨细胞,并以质粒pcDNA3转染细胞作为对照.转染24 h后通过链霉亲和素-生物素化过氧化物酶复合物法和原位杂交法检测目的基因瞬时表达的情况.采用G418筛选转染细胞2周,获得阳性细胞克隆,用链霉亲和素-生物素化过氧化物酶复合物法检测转染细胞稳定表达转化生长因子β1的情况.主要观察指标:链霉亲和素-生物素化过氧化物酶复合物法和原位杂交法检测转染细胞基因表达情况.结果:①pcDNA3-TGF-β1转染成骨细胞瞬时表达组化检测和原位杂交检测结果:24 h转染成骨细胞胞浆中充满染色的棕黄色颗粒,对照组空载体转染细胞胞浆中则没有棕黄色颗粒,说明转基因细胞中转化生长因子β1 mRNA明显增高.②G418筛选转基因细胞组化检测:G418筛选2周后的转染细胞仍然有较高的转化生长因子β1表达.结论:利用基因转染技术可使成骨细胞瞬时、高效表达细胞因子,转染后瞬时和筛选2周后,均呈现转化生长因子β1基因转染成骨细胞后稳定的高表达,说明采用细胞因子基因转染成骨细胞进行骨缺损的基因治疗具有可行性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨述华	华中科技大学同济医学院附属协和医院骨科	562	4404	28.0	40.0
2	杜靖远	华中科技大学同济医学院附属协和医院骨科	136	1407	20.0	29.0
3	郑启新	华中科技大学同济医学院附属协和医院骨科	247	1718	19.0	26.0
4	刘勇	华中科技大学同济医学院附属协和医院骨科	158	1356	20.0	28.0
5	段德宇	华中科技大学同济医学院附属协和医院骨科	44	391	11.0	18.0
6	郭晓东	华中科技大学同济医学院附属协和医院骨科	131	935	16.0	23.0