摘要:
目的:通过检测阿魏酸钠对联合培养的神经细胞和巨噬细胞中神经细胞的乳酸脱氢酶漏出量和微管相关蛋白-2的影响,观察阿魏酸钠对淀粉样β蛋白激活巨噬细胞引起神经细胞损伤的保护作用.方法:实验于2004-05/12在锦州医学院药理实验室和解剖实验室完成.选择8~10周龄的小鼠进行巨噬细胞培养,出生两三天的大乳鼠进行神经细胞培养.单独培养的神经细胞和巨噬细胞:将加入10μmol/L淀粉样β蛋白和未加入淀粉样β蛋白的巨噬细胞上清液分别移入单独培养的神经细胞中,通过Hoechst 33258染色检测神经细胞的凋亡百分比.联合培养的神经细胞和巨噬细胞:联合培养24 h后,加入10 μmol/L的淀粉样β蛋白,阿魏酸钠组同时加入不同浓度(10 μmol/L,100μmol/L,500 μmol/L, 1 mmol/L)阿魏酸钠共孵育.48 h后,采用免疫组织化学方法和乳酸脱氢酶检测试剂盒检测微管相关蛋白-2表达水平和乳酸脱氢酶漏出量.结果:将淀粉样β蛋白激活的巨噬细胞上清液移入到单独培养的神经细胞48 h后,可使凋亡神经细胞的百分比明显增加,从正常11.3%增加到74.0%,(P<0.01).在巨噬细胞和神经细胞联合培养中,淀粉样β蛋白组与空白对照组相比,乳酸脱氢酶漏出量明显增加,由375 nkat/L增加到2 859 nkat/L,微管相关蛋白-2表达阳性的神经元数目相应减少,与淀粉样β蛋白组相比,阿魏酸钠(10 μmol/L,100 μmol/L,500 μmol/L,1 mmol/L)能显著地降低乳酸脱氢酶漏出量,使微管相关蛋白-2表达阳性的神经细胞数目明显增加,呈剂量依赖性(P<0.05).结论:①淀粉样β蛋白是通过激活巨噬细胞,使其释放毒性物质,从而引起神经细胞的损伤.②阿魏酸钠对淀粉样β蛋白引起的神经细胞损伤具有保护作用