摘要:
目的:比较欧洲越桔和笃斯越桔对氧化应激损伤PC12细胞的保护作用,并观察其作用是否具有剂量依赖性.方法:实验于2004-10/2005-01在华东理工大学生物工程学院生物反应器国家重点实验室进行.PC12细胞以含12.5,25,50 mg/L的欧洲越桔标准提取物和笃斯越桔标准提取物的DMEM培养液预孵8 h后,以500μmol/L的H2O2干预12 h作为氧化应激损伤的模型,采用MTT比色法计算细胞死亡抑制率评估细胞存活情况(抑制率越高,存活细胞越多),DCFH-DA荧光染色法测定细胞内活性氧化物清除抑制率评估细胞内活性氧化物水平(抑制率越低,细胞内活性氧化物水平越低),Hoechst染色法观察细胞核形态学,流式细胞仪检测细胞凋亡.结果:①细胞死亡抑制率:笃斯越桔标准提取物25,50 mg/L组高于欧洲越桔标准提取物25,50 mg/L组(27.78%,23.66%;46.05%,41.67%),两种药物均为剂量越大,其抑制率越高.②PC12细胞内活性氧化物清除抑制率:笃斯越桔标准提取物25,50 mg/L组低于欧洲越桔标准提取物25,50 mg/L组(67.58%,80.61%;41.86%,56.69%),且剂量越大,其抑制率越低.③细胞凋亡率:正常对照组为0.69%,500μmol/L H2O2作用12 h后,为30.19%.预先给予欧洲越桔标准提取物和笃斯越桔标准提取物处理后,分别为9.45%,8.82%.结论:欧洲越桔和笃斯越桔对氧化应激损伤PC12细胞均具有保护作用,笃斯越桔作用优于欧洲越桔,且具有剂量依赖性效应.其机制可能与其能降低细胞内活性氧化物水平,进而抑制神经细胞凋亡有关.