摘要:
背景:近年来证实,成熟大脑在存活期间仍具有再生的可塑性,即结构和功能的重建.发育成熟的中枢神经系统,在脑缺血时Gap-43表达水平是评估轴突损伤和再生反应的一个重要指标.缺血性脑卒中后神经功能的恢复与脑的可塑性有关.目的:探讨早期康复训练对大鼠脑缺血半影区与神经重塑有关的生长蛋白Gap-43和突触素P38 mRNA的影响.设计:随机对照实验.单位:青岛大学医学院人体解剖学教研室.材料:实验于1999-12/2002-06在青岛大学医学院神经解剖实验室完成.选取成年健康雌性Wistar大鼠52只,随机分为假手术组4只,康复治疗组24只,自然恢复组24只.方法:康复治疗组和自然恢复组采用线栓法经颈外动脉插入4-0尼龙线建立大鼠大脑中动脉闭塞再灌注模型,假手术组除尼龙线插不到起始部位外,其余步骤相同.动物苏醒后出现左侧Homer征,提尾时右前肢内收屈曲,爬行时向右划圈为手术成功的标志.假手术组于术后24 h取材;康复治疗组大脑中动脉闭塞120 min再灌注6 h后置于MG迷宫中进行康复训练,2次/d,10~20 min/次,保证动物不疲劳,于术后6h,1,3,7,14,21 d取材;自然恢复组术后120 min再灌注6 h,1,3,7,14,21 d取材,作为自然病程对照.常规制作石蜡切片进行尼氏染色,应用VIDAS 21显微图像处理系统测定缺血半影区的反应产物吸光度(A)值,以同一张切片上未受损胼胝A值为背影,减去背影A值,得到校正A值.对缺血中心区的免疫活性未作量化处理.主要观察指标:①主要结局:脑缺血半影区生长蛋白Gap-43及突触素P38 mRNA原位杂交检测结果.②次要结局:康复治疗组缺血半影区细胞形态学观察.结果:实验纳入的52只大鼠全部进入结果分析.①脑缺血再灌注后不同时间点各组缺血半影区生长蛋白Gap-43和P38 mRNA的表达:假手术组皮质区着色浅,Gap-43和P38 mRNA表达的校正A值分别为0.37±0.12,0.70±0.14;自然恢复组Gap-43和P38 mRNA表达均于术后6 h和3 d开始增高,第7天达到高峰,第14天开始降低.康复治疗组Gap-43和P38 mRNA的表达在缺血再灌注后6 h,1,3,7,14,21 d均高于同期自然恢复组,但仅在第14天差异显著(1.19±0.60,0.87±0.18,t=4.13,P<0.05).②康复治疗组细胞形态学观察结果:低倍镜下可见缺血中心区神经细胞坏死,缺血半影区神经细胞的密度降低,神经元缺血样变性.胞体缩小呈三角形、扇形或长条形,细胞核固缩深染、核仁不清,胞浆呈空泡状.皮质神经元表现为胞浆疏松,核轻度变形、深染.变性神经元与正常神经元共存.手术14 d后缺血中心区和半影区可见大量胶质细胞增生.结论:与神经重塑有关的Gap-43和P38 mRNA在局部脑缺血再灌注后缺血半影区的表达十分活跃.早期康复训练能够使Gap-43和P38mRNA神经突起出芽并形成新的突触,从而增加脑的可塑性,可能涉及脑缺血后肢体功能的恢复.