摘要:
目的:观察重组人白细胞介素2对参与组织修复与瘢痕形成的效应细胞成纤维细胞增殖的影响,以及对细胞凋亡基因Fas和细胞凋亡抑制基因Bcl-2表达的影响.方法:实验于2003-01/05在昆明医学院第一附属医院临床医学实验研究中心完成.对5例瘢痕标本(患者知情同意)进行体外成纤维细胞培养,将培养的细胞分为实验组和对照组,每组设6个平行孔.实验组分别加入不同终浓度的的重组人白细胞介素2(100,250,500,750,1 000 U/mL)50 μL;对照组加相同容积的无血清Dulbecco改良的Eagle培养基培养液.于培养24,48,72 h观察成纤维细胞增殖情况采用四甲基偶氮唑盐测定各组吸光度(A)值,与对照组比较,A值越大表示细胞增殖越强;成纤维细胞DNA含量、Fas和Bcl-2表达情况应用流式细胞仪检测.结果:①体外培养的成纤维细胞增殖结果:实验组加入重组人白细胞介素2后72 h,其中250,500,750 U/mL浓度组显著高于与对照组(0.706±0.037,0.744±0.051,0.738±0.059,0.612±0.063,P<0.01),其增殖效果呈浓度依赖性反应,但1 000 U/mL的浓度组对成纤维细胞增殖无明显影响(P>0.05),对照组细胞48~72 h进入增殖状态,但其增殖结果与实验组比较差异显著(F=28.16,P<0.01).②成纤维细胞DNA含量结果:DNA合成期-DNA合成后期-分裂期细胞百分率明显升高,从58.8%~67.7%.③成纤维细胞Fas及Bcl-2蛋白表达结果:两者表达量均增高.结论:实验结果提示,重组人白细胞介素2对成纤维细胞的作用呈现浓度依赖性效应,再增加浓度并不能使其效应与之成正比,推测可能是因为其效应途径为配体和受体的结合,当受体被占据后,再增加配体的浓度也不能发挥起效应.该实验验证了重组人白细胞介素2促进成纤维细胞生物学活性的客观、直接的结果.