摘要:
目的:观察天然药物芦荟大黄素对增生性瘢痕成纤维细胞凋亡的作用.方法:实验于2001-06/2004-12在广东医学院整形外科研究所完成.成纤维细胞取自广东医学院附属医院整形外科患者手术切除的增生性瘢痕组织,瘢痕组织经处理后进行成纤维细胞原代及传代培养至第3~8代细胞.用剂量为40mg/L的芦荟大黄素分别处理对数生长期成纤维细胞[0(为对照组),24,48,72 h],以流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡率;观察加入不同浓度(0,20,40,60,80mg/L)芦荟大黄素后24 h对成纤维细胞凋亡的影响,采用特异性荧光染色和原位末端标记技术分别检测凋亡指数.结果:①芦荟大黄素作用不同时间对成纤维细胞周期和凋亡的影响:流式细胞术检测发现,用药24 h出现"亚二倍体峰"即凋亡峰,凋亡指数为(10.81±1.43)%,到48和72 h凋亡指数为(16.02±1.30)%和(21.58±1.56)%.随着作用时间的延长,DNA合成前期细胞百分数增多,DNA合成期的细胞含量逐渐减少,亚二倍体峰百分数增多(F=122.514,225.552,105.346,P<0.05).②芦荟大黄素对成纤维细胞凋亡的量效影响:荧光染色和原位末端标记法检测凋亡指数,均呈剂量依赖性增高[荧光染色:0 mg/L为(4.52±1.22)%,20 mg/L为(25.56±1.12)%,40mg/L为(56.20±2.20)%,80 mg/L为(80.05±2.12)%,F=1 350.737;原位末端标记法:0 mg/L为(3.85±1.15)%,20mg/L为(11.66±1.20)%,40mg/L为(23.12±1.06)%,80 mg/L为(40.31±1.43)%,F=511.487,P<0.01].结论:芦荟大黄素以时间依赖性的方式调节细胞周期并诱导增生性瘢痕成纤维细胞凋亡,还可呈量效关系促进成纤维细胞发生凋亡.