c-fos反义基因转染对缺血缺氧心肌细胞的保护作用

• 来源期刊: 中国临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 微管蛋白质类 肌钙蛋白T 原癌基因蛋白质c-fos 基因 转染
• 年，卷（期）: 2005,（35）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 35-38
• 页数: 4页
• 分类号: R364.4
• 字数: 5089字
• 语种: 中文

摘要

目的:探讨c-fos反义基因重组体转染对缺氧复合烧伤血清处理心肌细胞的保护作用.方法:实验于2002年在第三军医大学西南医院烧伤研究所完成.Wistar大鼠125只,正常对照组15只:未经缺血缺氧处理;非转染组45只:10%烧伤大鼠血清+缺氧(体积分数为0.01的氧);转染组45只:先转染,然后[10%烧伤大鼠血清+缺氧(体积分数为0.01的氧)]处理.转染组和非转染组均按照时相点不同又分为1,3,7 h三个时相点组,每组15只.烧伤血清采自30%全身体表面积Ⅲ度烫伤Wistar大鼠(20只).采用含体积分数为0.01氧的混和气体作为缺氧模型,采用基因重组技术构建c-fos反义基因重组体,由脂质体胺试剂介导心肌细胞转染,缺氧复合烧伤血清处理后1,3,7 h不同时相点采用反转录-多聚酶联反应检测c-fos mRNA的表达变化,检测c-fos蛋白、肌钙蛋白-T和β-微管蛋白的表达变化采用蛋白免疫印迹法.结果:105只大鼠进入结果分析.对照组、转染组1,3,7 h三个时相点及非转染组1,3,7 h三个时相点各15只,另外20只用于制备烧伤血清.①c-fos蛋白表达:非转染组显著表达,3 h达到最高峰,非转染组高于转染组(46.3±3.06,34.3±2.06,P＜0.01).②肌钙蛋白-T和β-微管蛋白的表达:与正常对照组比较,非转染组肌钙蛋白-T和β-微管蛋白表达显著下降,7 h降至最低水平,非转染组低于转染组(肌钙蛋白-T:25.1±3.06,34.3±2.06;β-微管蛋白:44.8±3.17,66.5±3.14,P＜0.01).结论:缺氧复合烧伤血清处理产生的c-fos会引起心肌细胞损伤,当在缺氧复合烧伤血清处理前转染c-fos反义基因后,心肌细胞肌钙蛋白-T和β-微管蛋白表达较单纯缺氧复合烧伤处理心肌细胞显著回升,表明c-fos反义基因转染能有效抑制心肌细胞肌钙蛋白-T和β-微管蛋白的表达下降,从而对缺血缺氧心肌细胞起保护作用.