构建中国汉族人亚健康状态肾阴虚证的DNA消减文库

• 作者: 付婷婷 代方国 崔丽娟 张曦倩 罗云坚 罗仁 赵晓山
• 来源期刊: 中国临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 肾阴虚 杂交 基因文库
• 年，卷（期）: 2005,（19）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 97-99
• 页数: 4页
• 分类号: R692
• 字数: 5975字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2005.19.057

摘要

目的:采用抑制性消减杂交技术构建汉族人亚健康状态肾阴虚证DNA消减文库.方法:实验于2004-02在南方医科大学南方医院糖尿病分子实验室完成.样本来源于南方医科大学南方医院汉族亚健康且中医辨证为肾阴.虚证的患者1例及健康自愿者1名作为其对照组.用硅胶法抽提血白细胞DNA,用RsaI酶切基因组DNA成大小不等的片段,分别与两种不同的接头连接,进行两次消减杂交及两次抑制性聚合酶链反应,将聚合酶链反应产物与U载体连接,经蓝白斑筛选后,再用聚合酶链反应方法插入片段筛选出阳性重组质粒,构建亚健康肾阴虚证DNA消减文库.结果:用抑制性消减杂交方法筛选出了亚健康肾阴虚证的差异DNA片段,得到680个白色克隆,随机调取96个白色克隆,再经聚合酶链反应方法快速筛选出阳性重组质粒91个,从而成功地构建了亚健康肾阴虚证的DNA消减文库.结论:抑制性消减杂交技术能够快速有效地分离差异DNA片段以构建亚健康肾阴虚证DNA消减文库,为进一步筛选和克隆亚健康肾阴虚证相关基因奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	罗仁	南方医科大学南方医院中医科	178	2253	25.0	39.0
2	罗云坚	广州中医药大学附属广东省中医院内二科	20	382	12.0	19.0
3	张曦倩	南方医科大学南方医院生殖中心	5	57	4.0	5.0
4	付婷婷	南方医科大学南方医院中医科	2	27	2.0	2.0
5	崔丽娟	南方医科大学南方医院中医科	4	73	4.0	4.0
6	赵晓山	广州中医药大学附属广东省中医院内二科	12	246	7.0	12.0
7	代方国	南方医科大学南方医院中医科	2	100	2.0	2.0