间接竞争ELISA方法测定水中2,4-D的研究

• 作者: 何苗 余若祯 施汉昌 钱易
• 来源期刊: 生态毒理学报
• 学科: 地球科学
• 关键词: 2,4-二氯苯氧乙酸 单克隆抗体 酶联免疫吸附试验 水样
• 年，卷（期）: 2006,（1）
• 所属期刊栏目: 方法与技术
• 页码范围: 88-92
• 页数: 5页
• 分类号: X502
• 字数: 3583字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-5897.2006.01.015

摘要

以2,4-D-BSA为包被抗原,采用自行制备的2,4-D单克隆特异性抗体6D11建立了水中2,4-D的间接竞争ELISA检测方法.本研究比较了包被抗原2,4-D-BSA浓度分别为240ng·mL-1、120ng·mL-1和60ng·mL-1的反应体系和竞争反应时间为60min和15min的间接竞争ELISA剂量-反应曲线,确定了当包被抗原浓度为60 ng·mL-1、竞争反应时间为15min时,剂量-反应曲线的IC50值较低.采用上述实验条件分别测定了由PBS缓冲溶液、饮用水、清华大学地下水和圆明园福海地表水配制的2,4-D标准溶液的剂量-反应曲线,发现实际水样的基质效应对检测结果的影响较大;采用实际水样和PBS缓冲溶液配水在含有5%乙醇的PBS缓冲体系中反应的方法,基本上消除了基质效应对检测结果的干扰.采用上述优化试验条件,测定2,4-D浓度分别为0.5mg·L-1、0.125mg·L-1和0.03mg·L-1的加标样品,测定数据的准确度符合痕量有机污染物定量检测对准确度的要求,但是平行样品测定数据之间的变异系数较大,需要进一步改进检测方法,用于实际水样的检测.