抗膜联蛋白Ⅰ单克隆抗体的制备及鉴定

• 作者: 朱明洁 胡晶莹 莫忠根 蔡幸 赵新泰
• 来源期刊: 肿瘤
• 学科: 医学
• 关键词: 钙磷脂结合蛋白类 杂交瘤 抗体,单克隆
• 年，卷（期）: 2006,（11）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 979-983
• 页数: 5页
• 分类号: R730.51
• 字数: 4479字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3781/j.issn.1000-7431.2006.11.004

摘要

目的:制备抗膜联蛋白Ⅰ单克隆抗体(mAb),对其进行特性鉴定,为在恶性肿瘤诊断和治疗中的应用打下基础.方法:构建膜联蛋白Ⅰ基因480 bp的原核表达载体pQE30 ANX Ⅰ,异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导蛋白表达,并用Ni NTA树脂亲和层析柱纯化蛋白.用纯化的膜联蛋白Ⅰ作为抗原免疫BAIB/c小鼠,取免疫小鼠的脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,经过HAT、HT选择培养及有限稀释法进行克隆化,制备抗膜联蛋白I蛋白的单克隆抗体,用ELISA、Western blot及免疫组织化学染色法进行特性鉴定.结果:获得5株分泌抗膜联蛋白Ⅰ mAb的杂交瘤细胞,分别命名为1A8、1D2、1E2、4E7和5G3,所产抗体,均为IgGl亚型,轻链均为κ链,亲和力为(2.3～3.03)×108L/mol.经Western blot证实获得的mAbs可以特异性识别膜联蛋白Ⅰ抗原;免疫组织化学染色结果也显示这些mAbs可以特异识别肿瘤组织中的膜联蛋白Ⅰ.结论:成功地获得了5株抗膜联蛋白I的mAbs,为进一步在肿瘤诊断和治疗中应用膜联蛋白Ⅰ抗体打下了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	胡晶莹	上海市肿瘤研究所细胞与分子免疫学实验室	10	37	3.0	5.0
2	朱明洁	上海市肿瘤研究所细胞与分子免疫学实验室	9	23	3.0	4.0
3	赵新泰	上海市肿瘤研究所细胞与分子免疫学实验室	21	47	4.0	6.0
4	莫忠根	上海市肿瘤研究所细胞与分子免疫学实验室	3	13	2.0	3.0
5	蔡幸	复旦大学上海医学院	1	3	1.0	1.0