可溶性尿激酶受体的表达、纯化和结晶

• 作者: 卞传兵 淮清 袁彩 黄明东
• 来源期刊: 生物化学与生物物理进展
• 学科: 生物学
• 关键词: 可溶性尿激酶受体 纯化 复合物结晶
• 年，卷（期）: 2006,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 277-281
• 页数: 5页
• 分类号: Q71
• 字数: 2997字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-3282.2006.03.011

摘要

克隆尿激酶受体可溶区域(suPAR)到果蝇胚胎细胞分泌表达载体pMT/Bip/v5-his,重组质粒与pCoHygro共转染果蝇S2细胞,筛选多拷贝稳定表达细胞系suPARS2.suPAR表达蛋白经尿激酶N端片段亲和柱、ResourceQ阴离子交换柱两步纯化后,得到高纯度的、稳定的suPAR单体.纯化后的蛋白质,与其抗体ATN615及尿激酶N端片段结构域等摩尔混合,浓缩至10 g/L,以透析法进行该三元复合物晶体生长,获得衍射分辨率为1.9 (A)的蛋白质晶体.