利用RAPD-STS和实时定量PCR鉴别菠菜枯萎病病原菌(Fusarium oxysporum f.sp.spinaciae)

• 作者: 姜廷波
• 来源期刊: 植物病理学报
• 学科: 农学
• 关键词: 菠菜病害 病原菌 PCR
• 年，卷（期）: 2006,（3）
• 所属期刊栏目: 病原学
• 页码范围: 212-218
• 页数: 7页
• 分类号: S436.3
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0412-0914.2006.03.003

摘要

菠菜枯萎病是由致病性镰刀菌(F. O.f. Sp.spinaciae)引起的,是菠菜生产中的重要病害之一.利用常规方法鉴定菠菜枯萎病病原菌需耗费大量时间,并且很难得到正确的结论.随机扩增多态性DNA序列标签(Randomly amplifiedpolymorphic DNA-sequence tagged sites,RAPD-STS)为病原菌鉴定提供了一种有效方法.本研究通过对供试菌株的RAPD分析,克隆出了1个菠菜枯萎病病原菌的特异片段(GenBank登录号:AY337463).根据测序结果设计了1对菠菜枯萎病病原菌的特异引物,并利用常规PCR和实时定量PCR(real-time PCR)2种方法对病原菌进行了鉴定,并对2种方法的敏感性进行了比较.结果表明,2种PCR方法都可以鉴定菠菜枯萎病病原菌(F. O.f.sp.spinaciae),但二者对病原菌DNA敏感程度不同,常规PCR检测的最低DNA量100pg,而实时定量PCR检测的最低DNA量是1pg.同时,实时定量PCR还可以对病原菌DNA进行定量分析,并依此估算病原菌的数量.该方法可用于菠菜枯萎病病原菌的快速鉴定和病因诊断.