人和小鼠白细胞介素-5重组蛋白疫苗的提取

• 作者: 施蓉萍 王才春 谭光宏 韩忠
• 来源期刊: 海南大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 白细胞介素-5 重组蛋白质 原核表达载体
• 年，卷（期）: 2006,（3）
• 页码范围: 300-304
• 页数: 5页
• 分类号: Q78
• 字数: 3954字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-1729.2006.03.019

摘要

利用PCR技术从含有人和小鼠IL-5基因的质粒pORF9-hIL-5和pORF9-mIL-5质粒中扩增出人和小鼠IL-5基因序列,然后利用基因工程技术将人和小鼠IL-5基因序列分别插入原核表达质粒pQE30,获得人和小鼠IL-5重组表达质粒pQE-hIL-5和pQE-mIL-5.用酶切和DNA序列测定方法证实pQE-hIL-5和pQE-mIL-5正确后,转化感受态大肠杆菌JM109.用IPTG诱导表达重组蛋白,表达产物经Ni-NTA亲合层析进行分离纯化,最后用SDS-PAGE和免疫印迹法进行鉴定.结果表明:琼脂糖凝胶电泳发现PCR扩增的人和小鼠IL-5基因序列相对分子质量大小和预期值一致,酶切pQE-hIL-5和pQE-mIL-5片段和预期值相符,DNA序列测定插入的人和小鼠IL-5 PCR产物基因序列和阅读框架正确无误.重组蛋白质在大肠杆菌中获得稳定表达,表达的重组蛋白相对分子质量与预期值相一致,纯化的蛋白浓度达93%以上,抗组氨酸抗体可特异性识别hIL-5和mIL-5重组蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	韩忠	海南医学院海南省热带病重点实验室	22	90	5.0	8.0
5	谭光宏	海南医学院海南省热带病重点实验室	43	127	8.0	9.0
6	王才春	海南医学院海南省热带病重点实验室	16	35	3.0	5.0
10	施蓉萍	海南医学院附属医院呼吸内科	13	34	3.0	5.0