卵巢癌肿瘤标记物HE4基因的分子克隆与蛋白表达

• 作者: 吴英松 宁云山 李明 董文其 陈洁晶
• 来源期刊: 热带医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 卵巢癌 HE4基因 克隆 表达
• 年，卷（期）: 2006,（5）
• 所属期刊栏目: 硕博专栏
• 页码范围: 493-495
• 页数: 3页
• 分类号: R737.31
• 字数: 2095字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-3619.2006.05.006

摘要

目的构建HE4基因及蛋白表达系统,用于卵巢癌的早期诊断.方法提取卵巢癌细胞H08910的总RNA,利用RT-PCR技术扩增HE4基因,然后将该片段进行T-A克隆并测序鉴定,纯化回收后亚克隆于原核表达载体PGEX-4T-1中,然后提取质粒,酶切鉴定,最后经IPTG诱导,原核表达重组子在TOP10宿主菌进行表达,并进行SDS-PAGE、Western Blot分析与鉴定.结果应用RT-PCR技术,从卵巢癌HO8910的总RNA中扩增到一条大小约为400 bp的片段,经T-A克隆与测序鉴定,证实此片段为HE4基因,将PGEX-4T-1重组子转化入宿主菌,用IPTG诱导菌体表达HE4重组蛋白,经SDS-PAGE电泳和Western Blot鉴定证实,在相对分子量约39 000处可见明显的特异性的高表达条带.结论已成功克隆HE4基因,并经IPTG诱导在TOP10宿主菌中表达了相应的蛋白,为进一步制备卵巢癌的早期诊断试剂奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李明	南方医科大学生物技术学院	212	862	14.0	18.0
2	吴英松	南方医科大学生物技术学院	123	499	11.0	16.0
3	宁云山	南方医科大学生物技术学院	29	79	4.0	7.0
4	董文其	南方医科大学生物技术学院	43	142	6.0	9.0
5	陈洁晶	南方医科大学生物技术学院	2	16	1.0	2.0