应用RNA干扰技术研究激素非依赖性高转移潜能前列腺癌细胞中survivin的表达及意义

• 作者: 宁钧宇 崔湘琳 方伟岗 朱翔 王洁良 由江峰 郑杰
• 来源期刊: 中华病理学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 前列腺肿瘤 肿瘤侵润 基因,抑制,肿瘤
• 年，卷（期）: 2006,（9）
• 所属期刊栏目: 实验病理学
• 页码范围: 549-554
• 页数: 6页
• 分类号: R73
• 字数: 5665字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j.issn:0529-5807.2006.09.009

摘要

目的 研究survivin在激素非依赖性高转移潜能前列腺癌中的表达及其与前列腺癌的生物学行为及侵袭和转移潜能的相关性.方法 应用RNA干扰技术构建survivin真核表达载体,转染人激素非依赖性前列腺癌高转移亚系PC-3M-1E8细胞系.通过细胞生长曲线、肿瘤细胞裸鼠异种接种、软琼脂集落形成实验检测体内、体外细胞生长能力;流式细胞术检测survivin RNA干扰质粒对细胞周期及细胞凋亡的影响,Western blot检测caspase3活性片段,观察survivin抑制细胞凋亡的情况;Matrigel穿膜实验检测肿瘤细胞体外侵袭能力.结果 稳定转染survivin RNA干扰质粒的PC-3M-1E8细胞中survivin的mRNA及蛋白水平明显降低,蛋白水平与阴性对照组相比,约下降78%～80%,差异有统计学意义(P＜0.01);体外培养细胞生长速度及裸鼠体内肿瘤生长速度均明显减慢,锚着不依赖性生长的能力(软琼脂克隆形成数:14.33±3.51)与阴性对照组(52.33±6.81)及空白对照组(54.00±6.00)相比明显降低(P＜0.01);凋亡细胞比例明显增加,空白对照组、阴性对照组及干扰阳性组的凋亡比例分别为5.88±0.99、6.97±1.60、16.40±1.95,干扰阳性组的凋亡比例显著高于对照组(P＜0.01),并伴有caspase3活性片段的表达增加;细胞阻滞在G0/G1期(干扰阳性组、阴性对照组及空白对照组的细胞G0/G1期的比例分别为52.71±1.10、43.59±1.83及43.65±3.44,P＜0.05),并在细胞形态学上出现多核巨细胞现象;细胞体外侵袭能力明显降低,干扰阳性组的细胞(38.67±6.59)与阴性对照组(46.07±9.97)及空白对照组(47.87±9.58)相比穿膜细胞数明显减少(P＜0.05).结论 survivin在激素非依赖性高转移潜能前列腺癌中高表达,并与细胞凋亡、细胞生长及肿瘤侵袭有关.抑制survivin的表达可能成为临床治疗激素非依赖性前列腺癌的方法之一.