hsBLyS基因在中国仓鼠卵巢细胞中的表达及其在免疫小鼠中诱发的抗体反应

• 作者: 刁振宇 吴海涛 吴玉蓉 张双全 李洁 胡云龙 金丽娜
• 来源期刊: 动物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: hsBLyS 中国仓鼠卵巢细胞 真核分泌表达 基因免疫
• 年，卷（期）: 2006,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 130-137
• 页数: 8页
• 分类号: Q95
• 字数: 5445字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-5507.2006.01.015

摘要

为建立稳定表达人可溶性B淋巴细胞刺激因子(hsBLyS)的中国仓鼠卵巢(CHO)细胞系,从人胎盘cDNA文库中扩增hsBLyS基因,将人红细胞生成素(EPO)信号肽序列和hsBLyS基因重叠延伸为融合基因;融合基因分别插入pcDNA3、pcDNA3.1、pEFneo质粒;磷酸钙共沉淀将表达质粒和标志质粒pSV-dhfr,共转染CHO-dhfr-细胞;选择培养液筛选,经氨甲喋呤选择压力扩增表达,获稳定表达hsBLyS的细胞系,表达量由0.13μg/ml上升至0.55 μg/ml;同时利用pEFneo/hsBLyS重组质粒免疫BALB/c小鼠,检测结果表明小鼠产生hsBLyS的特异性抗体.本实验建立了稳定表达hsBLyS的CHO细胞系,对其基因免疫小鼠抗体产生的特点做了初步探讨,为hsBLyS进一步研究奠定了良好的基础[动物学报52(1):130-137,2006].