蚊抗药性相关糜蛋白酶基因表达、纯化及活性分析

• 作者: 孙立新 孙艳 孙静 钱瑾 马磊
• 来源期刊: 中国病原生物学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 糜蛋白酶 原核表达 纯化 酶活性
• 年，卷（期）: 2006,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 412-415
• 页数: 4页
• 分类号: R3
• 字数: 3331字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-5234.2006.06.005

摘要

目的 表达、纯化淡色库蚊溴氰菊酯抗性相关糜蛋白酶(NYD-Ch)基因并进行酶活性分析. 方法 应用PCR和基因重组技术,构建原核表达载体,表达目的蛋白;用酶促底物法测定表达蛋白NYD-Ch的酶学活性和最适pH值. 结果 成功构建重组表达载体pET32a(+)/NYD-Ch,并转化到感受态菌E. coli BL21(DE3)中.SDS-PAGE和Western blot显示,目的蛋白分子质量与理论值相符.NYD-Ch最大活力通过S(Ala)2ProPhe-pNA获得.NYD-Ch活力随pH的增高而增大,在pH 8.01～11.0的范围内较高,pH 10.0时达最高.抑制剂PMSF、SBTI、TPCK对NYD-Ch酶活力均有明显的抑制作用. 结论 成功表达了NYD-Ch蛋白,并分析了其酶学活性.本结果为深入研究NYD-Ch与杀虫剂抗性关系奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙静	南京医科大学基础医学院病原生物学系	45	244	10.0	14.0
2	马磊	南京医科大学基础医学院病原生物学系	33	176	8.0	11.0
3	孙艳	南京医科大学基础医学院病原生物学系	36	151	7.0	10.0
4	钱瑾	南京医科大学基础医学院病原生物学系	3	8	2.0	2.0
5	孙立新	南京医科大学基础医学院病原生物学系	3	8	2.0	2.0