蛋白质在固定Zn2+金属螯合亲和色谱中的变性热力学

• 作者: 李蓉 赵文明 陈国亮
• 来源期刊: 分析化学
• 学科: 化学
• 关键词: 金属螯合亲和色谱 蛋白质 热力学 热变性
• 年，卷（期）: 2006,（1）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 57-61
• 页数: 5页
• 分类号: O6
• 字数: 5147字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0253-3820.2006.01.013

摘要

在15～85℃宽温度范围,研究了蛋白质在固定Zn2+金属螯合色谱系统中的热行为和变性热力学.实验结果表明,蛋白质在色谱过程都有一个固定的热转变温度:核糖核酸酶(RNase)、α-胰凝乳蛋白酶原A(α-Chy)的热转变温度约为55℃,细胞色素C(Cyt-C)和溶菌酶(Lys)约为65℃;,热转变温度的出现标志蛋白质构象发生变化;利用Van't Hoff作图测定了蛋白质在色谱系统热变性时的标准焓变△H°和标准熵变△S.,提出用标准熵变△S.和自由能变△G°判断蛋白质构象变化;利用△H°-△S.的线性关系估算了蛋白质热变性时的补偿温度,鉴定了蛋白质各变体在金属螯合色谱中保留机理的同一性,RNase、Cyt-C、Lys和α-Chy的补偿温度分别为55℃、65.8℃、65.2℃和54.8℃;根据蛋白质热变性时的补偿温度和构象变化熵变△(△S.)的大小,讨论了蛋白质在阳离子交换色谱和固定Zn的金属螯合色谱体系中的热稳定性.实验证明,在IDA裸柱引入Zn2+后蛋白质在色谱系统中的热稳定性减小,平均补偿温度从65.3℃降低到59.7℃,而构象变化熵变的绝对值大幅度升高.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵文明	西安交通大学生命科学与技术学院	65	1643	25.0	39.0
2	李蓉	西安交通大学生命科学与技术学院	43	322	11.0	16.0
6	陈国亮	西北大学化工学院	20	260	8.0	15.0