白斑综合症病毒与对虾血淋巴细胞的体外结合实验

• 作者: 宋晓玲 梁艳 解飞霞 黄倢
• 来源期刊: 水生生物学报
• 学科: 农学
• 关键词: 白斑综合症病毒 对虾 血淋巴细胞 结合
• 年，卷（期）: 2006,（4）
• 页码范围: 386-393
• 页数: 8页
• 分类号: S945.4
• 字数: 6318字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-3207.2006.04.003

摘要

通过差速离心和蔗糖密度梯度离心,从感染了白斑综合症病毒(WSSV)的病虾头胸部分离了WSSV,利用地高辛对病毒蛋白进行了标记(DIG-WSSV),以体外培养的对虾血淋巴细胞为吸附基底,观察和分析了病毒与细胞间的结合现象及特性.以NBT/BCIP为酶反应显色底物观察到在细胞周围形成许多暗紫色颗粒,证实病毒与细胞间存在着稳定的结合.以OPD为酶反应显色底物分析了结合反应的特性:当DIG-WSSV维持恒定值时,随着血淋巴细胞数量的增加结合显色增强,细胞数量达到1.2×104 cells/孔,492nm处的吸光值达到饱和;当血淋巴细胞数量维持恒定值时,随着DIG-WSSV蛋白含量的增加显色增强,且在DIG-WSSV的蛋白浓度达到4μg/孔时,492nm处的吸光值达到饱和;未标记WSSV可竞争抑制血淋巴细胞与DIG-WSSV间的结合作用.进一步的研究得出:4℃下,随着结合时间的延长显色增强,但继续延长结合时间显色反而减弱;缓冲液的渗透压对结合结果影响甚微,而酸性条件利于病毒与细胞间的结合.37℃孵育对病毒结合活性影响不大,55℃和70℃孵育可显著影响病毒的结合活性;短时间超声波处理病毒可增加病毒结合能力,长时间超声波处理可破坏病毒结合能力;有机溶剂处理同样可破坏病毒结合能力,其中尤以氯仿/甲醇的处理更为激烈;不同的去垢剂对病毒结合活性的影响结果不同:SDS和脱氧胆酸钠可以降低病毒的结合活性,而Triton X-100和NP-40可以提高病毒的结合活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	宋晓玲	中国水产科学研究院黄海水产研究所	54	1077	23.0	31.0
2	黄倢	中国水产科学研究院黄海水产研究所	111	1805	25.0	37.0
3	解飞霞		2	19	2.0	2.0
4	梁艳		1	4	1.0	1.0