改造地高辛标记DNA和检测试剂盒用于凝胶阻滞实验的新方法

• 作者: 刘靖 柴团耀 柴小清 祁小廷
• 来源期刊: 遗传
• 学科: 生物学
• 关键词: 凝胶阻滞实验 地高辛 探针
• 年，卷（期）: 2006,（6）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 721-725
• 页数: 5页
• 分类号: Q3
• 字数: 3584字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0253-9772.2006.06.016

摘要

凝胶阻滞实验(gel retardation),又称为电泳迁移率变动实验(Electrophoretic mobility shift assay,EMSA),是研究蛋白和DNA相互作用的一种技术.传统的32P标记探针的凝胶阻滞实验,具有很高的灵敏度,然而也有接触危险性的放射性同位素且不容易定量分析的缺点.最近利用非放射性标记的凝胶阻滞实验,已有很多成功的报道,该方法快捷,安全,灵活,但非放射性标记探针的凝胶阻滞试剂盒的费用却很高.在论文中,我们提供了一种改造地高辛标记DNA和检测试剂盒用于凝胶阻滞实验的新方法.首先将双链DNA探针末端引入EcoRⅠ粘性末端以便进行3′末端标记,然后利用价格比较便宜的地高辛标记DNA和检测试剂盒(DIG High Prime DNA Labeling and Detection Starter Kit Ⅱ, Rohe) 进行探针标记和凝胶阻滞信号检测.经过多次实验参数的摸索,最终得到了成功的结果,为利用地高辛标记DNA和检测试剂盒进行凝胶阻滞实验提供了成功的例子和方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	柴团耀	中国科学院研究生院生物系	38	767	19.0	27.0
2	柴小清	首都师范大学生命科学学院	7	134	6.0	7.0
3	刘靖	首都师范大学生命科学学院	6	224	6.0	6.0
4	祁小廷	中国科学院研究生院生物系	1	22	1.0	1.0