胚胎大鼠腹侧中脑区域神经干细胞的培养及鉴定

• 作者: 曾水林 朱建宝 李涛 王磊 闫福麟 雷志年
• 来源期刊: 军医进修学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: 细胞 培养的 大鼠 中脑
• 年，卷（期）: 2006,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 257-259
• 页数: 3页
• 分类号: R394.26
• 字数: 3220字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-1139.2006.04.006

摘要

目的:探讨胚胎大鼠腹侧中脑区域神经干细胞(neural stem cell,NSCs)的分离、培养、传代及鉴定的方法.方法:分离E14.5胚胎大鼠腹侧中脑组织,用机械吹打方法形成细胞悬液,接种到含有表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)、碱性成纤维生长因子(fibroblast growth factor-basic,bFGF)、B27(B27 suplement)的DMEM/F12(1∶ 1)的无血清培养液中培养,待形成原代克隆球后,用有限稀释法进行单细胞克隆和传代扩增,以获得大量来源相同的NSCs克隆球,并且进行Brdu和Nestin检测;然后取培养细胞诱导分化后行GFAP,NeuN,TH检测.结果:E14.5胚胎大鼠腹侧中脑组织细胞培养两周后可以形成较多的悬浮生长的神经球,经单细胞克隆和传代扩增后得到大量的同源细胞克隆球.经过Brdu和Nestin的免疫细胞化学检测90%以上的细胞呈阳性;诱导分化后细胞呈GFAP,NeuN阳性,少量细胞呈TH阳性.结论:从E14.5胚胎大鼠腹侧中脑组织分离得到的细胞具有不断增殖和自我更新的能力,是胚胎大鼠中枢神经系统的NSCs,并可以分化为TH阳性神经元.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王磊	东南大学神经生物研究所	145	2072	23.0	42.0
2	李涛	东南大学神经生物研究所	93	631	14.0	21.0
3	曾水林	东南大学神经生物研究所	57	327	10.0	15.0
4	雷志年	东南大学神经生物研究所	11	51	4.0	6.0
5	朱建宝	东南大学神经生物研究所	36	147	6.0	10.0